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α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)试剂盒规格

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更新时间:2022-01-23 16:55:48浏览次数:1015次

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产品规格 24样、48样、 检测方法 可见分光光度法、微板法
货号 GOY-016575
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产品名称:α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)试剂盒规格

规格:24样、48样、

货号:GOY-016575

检测方法:可见分光光度法、微板法

产品分类:细胞壁代谢系列

公司产品仅用于科研贮存温度:28℃

本试剂盒保质期:6个月

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【实验前溶液配制】

配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复

溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。

配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19

稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量

配制洗涤液。

配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1

浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。

【所用仪器、试剂】

       :微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装

置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:单道 20μl~200μl100μl~1000μl、多道 250μl

           :乙腈、中性氧化铝


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测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水149稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.40.5ml血浆);

、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

TRBF1 (omeric repeat binding factor 1)  端粒体复制结合因子1抗原

TRIM32(tripartite motif protein 32)  TRIM32抗原

Trop-2/Tpm2 peptide  原肌球抗原

TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4)  生精凋亡相关基因4抗原

TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor)  恶性肿瘤特异性生长因子抗原

CIDEB peptide  CIDEB抗原

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein)  Tsg101抗原

TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)  促甲状腺受体抗原

MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3)  自噬微管相关轻链3抗原

TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1)  肺癌肿瘤阻抑基因1抗原

TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1)  甲状腺核转录因子-1抗原

Tubulin- Gamma  微管抗原

TWIST protein peptide  TWIST抗原

T Beta10 peptide  β10抗原

UCN(Urocortin)mouse ret  新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)定量PCR扩增检测试剂盒牛型放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒

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操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。


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