细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品名称 | |
英文名称 | A549/DDP |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
英文名称HumanGlycoprotein96人肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA试剂盒规格:96T/48T 阿奇霉素 Azithromycin 质量规格:美国进口
英文名称Humangp130solublefragme人gp130规格:96T/48T 阿奇霉素-d3 Azithromycin-d3 质量规格:美国进口
英文名称HumanGranulocyteChemotacticProtein-2人中性粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2)规格:96T/48T Δ6,7-巴卡丁 III Δ6,7-Baccatin III 质量规格:美国进口
英文名称HumanGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)规格:96T/48T 10-去乙酰巴卡丁III 10-Deacetylbaccatin-III 质量规格:美国进口
英文名称HumanGrowthhormone人生长因子(GH)规格:96T/48T 7-O-(三乙基硅基)-10-去乙酰巴卡丁III 7-O-(Triethylsilyl)-10-deacetyl Baccatin III 质量规格:美国进口
英文名称HumanGSH-PX人谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)规格:96T/48T Δ6,7-巴卡丁III Δ6,7-Baccatin III 质量规格:美国进口
英文名称HumanHaptoglobin人结合珠蛋白(Hpt)规格:96T/48T R-(+)-巴氯芬盐酸盐 R-(+)-Baclofen hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称HumanHbA1c人糖化血红蛋白(HbA1c)ELISA试剂盒规格:96T/48T 倍氯米松 Beclomethasone 质量规格:美国进口
英文名称HumanHCG人绒毛促性腺激素(HCG)规格:96T/48T 苯佐卡因-d4 Benzocaine-d4 质量规格:美国进口
英文名称HumanHCY人同型半胱氨(HCY)规格:96T/48T 盐酸苯达莫司汀-d5 Bendamustine-d5 (major) Hydrochloride 质量规格:美国进口
人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)免疫试剂盒 Human α-GST ELISA Kit O-去甲基加兰他敏β-D-葡萄糖苷酸 O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
英文名称MouseDPDELISAKit小鼠脱氧吩(DPD)规格:96T/48T 异吉非罗齐(吉非罗齐杂质) iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity) 质量规格:美国进口
Susa固着液50毫升 吉非罗齐1-O-β-葡萄糖苷酸-d6 Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6 质量规格:美国进口
rabbitInsulin,INSELISA试剂盒兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 吉非罗齐1-O-β-葡萄糖苷酸 Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide 质量规格:美国进口
小鼠二(MDA)ELISA试剂盒 ,英文名: MDA ELISA Kit 格列齐特-d4 Gliclazide-d4 质量规格:美国进口
大鼠活化素A(Activin-A)ELISA检测试剂盒RatActivinAELISAKit 96T/48T 外消旋顺式-3-羟基格列本脲-d3,13C rac cis-3-Hydroxy Glyburide-d3,13C 质量规格:美国进口
人α肌动蛋白(α Actin)免疫试剂盒 Human Alpha-Actin,α Actin ELISA Kit 外消旋反式-4-羟基格列本脲 rac trans-4-Hydroxy Glyburide 质量规格:美国进口
英文名称MouseMotilinELISAKit小鼠胃动素(MTL)规格:96T/48T 外消旋顺式-3-羟基格列本脲 rac cis-3-Hydroxy Glyburide 质量规格:美国进口
SOCS20 顺式-格列美脲 cis-Glimepiride 质量规格:美国进口
rabbitImmunoglobulinG,IgGELISA试剂盒兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T 反式-羧基格列美脲 trans-Carboxy Glimepiride 质量规格:美国进口
A549/DDP人肺癌顺铂耐药株图片10-去乙酰巴卡丁III 10-Deacetylbaccatin-III 质量规格:美国进口 英文名称HumanGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactorELISAKit人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)规格:96T/48T
7-O-(三乙基硅基)-10-去乙酰巴卡丁III 7-O-(Triethylsilyl)-10-deacetyl Baccatin III 质量规格:美国进口 英文名称HumanGrowthhormoneELISAKit人生长因子(GH)规格:96T/48T
Δ6,7-巴卡丁III Δ6,7-Baccatin III 质量规格:美国进口 英文名称HumanGSH-PXELISAKit人谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)规格:96T/48T
R-(+)-巴氯芬盐酸盐 R-(+)-Baclofen hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称HumanHaptoglobinELISAKIT人结合珠蛋白(Hpt)规格:96T/48T
倍氯米松 Beclomethasone 质量规格:美国进口 英文名称HumanHbA1cELISAKit人糖化血红蛋白(HbA1c)ELISA试剂盒规格:96T/48T
苯佐卡因-d4 Benzocaine-d4 质量规格:美国进口 英文名称HumanHCGELISAKit人绒毛促性腺激素(HCG)规格:96T/48T
盐酸苯达莫司汀-d5 Bendamustine-d5 (major) Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称HumanHCYELISAKit人同型半胱氨(HCY)规格:96T/48T
苯达莫司汀Bis-mercapturic 酸 Bendamustine Bis-mercapturic Acid 质量规格:美国进口 英文名称HumanHeatShockProtein20ELISAKit人热休克蛋白20(HSP20)ELISA试剂盒规格:96T/48T
17-Oxo倍他米松 17-Oxo Betamethasone 质量规格:美国进口 英文名称HumanHeatShockProtein40ELISAKit人热休克蛋白40(HSP40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
倍他米松-d5 Betamethasone-d5 质量规格:美国进口 英文名称Humanheatshockprotein60ELISAKit人热休克蛋白60(Hsp60)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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