BEL-7402-RFP荧光标记细胞株说明书实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | BEL-7402-RFP |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
英文名称HumanAquaporin5人水通道蛋白5(AQP5)规格:96T/48T 2,2-二乙氧基苯乙酮(>95.0%(GC)) 2,2-Diethoxyacetophenone 质量规格:>95.0%(GC)
英文名称Humanargininevasopressin人精氨酸加压素规格:96T/48T 2,2-二甲氧基-2-乙酮(>98.0%(GC)) 2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanAT-III人抗凝血酶(AT-III)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2,4-二乙基硫杂蒽-9-酮(>90.0%(GC)) 2,4-Diethylthioxanthen-9-one 质量规格:>90.0%(GC)
英文名称HumanAβ1-40protein人Aβ1-40蛋白规格:96T/48T 2-乙基蒽醌(>98.0%(GC)) 2-Ethylanthraquinone 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanAβ1-42protein人Aβ1-42蛋白规格:96T/48T 1-羟环己基苯酮(>98.0%(GC)) 1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanB1-AR人心肌细胞膜B1-AR规格:96T/48T 二苯基鎓六氟盐(>97.0%(T)) Diphenyliodonium Hexafluorophosphate 质量规格:>97.0%(T)
英文名称HumanBAFF人B细胞活化因子(BAFF)规格:96T/48T 2-(4-甲氧苯基)-4,6-双(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanBAFF-R人B细胞活化因子受体(BAFF-R)规格:96T/48T 三苯基化锍(>98.0%(T)) Triphenylsulfonium Bromide 质量规格:>98.0%(T)
英文名称HumanBALP人BALP规格:96T/48T *基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化铵(>98.0%(T)) Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 质量规格:>98.0%(T)
英文名称HumanBetacellulin人BTC规格:96T/48T 1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N)) 1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea 质量规格:>94.0%(N)
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 (S)-布洛芬 (S)-Ibuprofen 质量规格:美国进口
Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒 依那普利 Enalapril 质量规格:美国进口
Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 1,3-二苄基-5-氟尿嘧啶 1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil 质量规格:美国进口
Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA试剂盒人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1,3-二(苄氧基甲基)-5-氟尿嘧啶 1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil 质量规格:美国进口
植物总RNA化试剂盒(高多糖/酚)20 5-氟乳清酸水合物 5-Fluoroorotic acid hydrate 质量规格:美国进口
HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T 5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶 5-Fluoro-1,3-dimethyluracil 质量规格:美国进口
小鼠程序性死亡1(PD-1)ELISA试剂盒 ,英文名: PD-1 ELISA Kit 5-氟尿嘧啶核苷 5-Fluorouridine 质量规格:美国进口
大鼠肝脂酶(HL)ELISA检测试剂盒Rathepaticlipase,HLELISAKit 96T/48T 5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 质量规格:美国进口
人β-防御素3 免疫试剂盒 Human β-defensins 3 ELISA Kit 舒马曲坦-d6 Sumatriptan-d6 质量规格:美国进口
英文名称MouseangiotensionⅠELISAKit小鼠血管紧张素I(AngI)规格:96T/48T 舒马曲坦-d6琥珀酸盐 Sumatriptan-d6 Succinate 质量规格:美国进口
2-乙基蒽醌(>98.0%(GC)) 2-Ethylanthraquinone 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanAβ1-40proteinELISAKit人Aβ1-40蛋白规格:96T/48T
1-羟环己基苯酮(>98.0%(GC)) 1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanAβ1-42proteinELISAKit人Aβ1-42蛋白规格:96T/48T
二苯基鎓六氟盐(>97.0%(T)) Diphenyliodonium Hexafluorophosphate 质量规格:>97.0%(T) 英文名称HumanB1-ARELISAKit人心肌细胞膜B1-AR规格:96T/48T
2-(4-甲氧苯基)-4,6-双(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanBAFFELISAKit人B细胞活化因子(BAFF)规格:96T/48T
三苯基化锍(>98.0%(T)) Triphenylsulfonium Bromide 质量规格:>98.0%(T) 英文名称HumanBAFF-RELISAKit人B细胞活化因子受体(BAFF-R)规格:96T/48T
*基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化铵(>98.0%(T)) Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 质量规格:>98.0%(T) 英文名称HumanBALPELISAKit人BALP规格:96T/48T
1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N)) 1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea 质量规格:>94.0%(N) 英文名称HumanBetacellulinELISAKit人BTC规格:96T/48T
苄酰基无色亚甲基兰(>95.0%(HPLC)(T)) Benzoyl Leuco Methylene Blue 质量规格:>95.0%(HPLC)(T) 英文名称humanBeta-EndorphinELISAKIT人β-内啡肽(Beta-Endorphin)ELISAKIT规格:96T/48T
结晶紫内酯(>95.0%(HPLC)(T)) Crystal Violet Lactone 质量规格:>95.0%(HPLC)(T) 英文名称HumanbFGFELISAKit人碱性成纤维生长因子(bFGF)规格:96T/48T
6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基荧烷(>98.0%(HPLC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 英文名称HumanBLC-1/CXCL13ELISAKit人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)规格:96T/48T