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pHyVec4

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更新时间:2019-10-28 10:45:51浏览次数:534次

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pHyVec4质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进行编码基因、microRNA、lncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子及3’UTR调控研究等。

100380-200301 更昔洛韦 含量测定 50mg

100381-200301 肾上腺色腙 检查用 50mg

100382-200301 紫杉醇 含量测定 30mg

100384-200501 大蒜素 含量测定 0.5ml

100385-200401 豆腐果苷 HPLC法含量测定 100mg

100386-200702 吡拉西坦 含量测定 100mg

100387-200401 呋咱甲氢龙(夫拉扎勃) 含量测定 50mg

100388-200401 泊苷 含量测定 100mg

100389-200301 间苯二酚 含量测定 50mg

100390- 200502 维生素B1 含量测定 100mg

维生素BT 含量测定 100mg

100394-200401 乙水杨胺 含量测定 100mg

质粒名称:pHyVec4
质粒规格:2ug

实验步骤:
1)质粒提取
1.10,0001min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中
2.加入100溶液1,振荡至*悬浮
3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置
3分钟
4.加入150山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,00g离心10mins
5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的苯酚/氖仿/异成醇混
合均匀10,000离心5min
将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水,室温放置5-1omin,沉
降DNA
7.10000g离心10分钟,弃,保留沉淀,加入1ml706的洗涤沉淀,10,000离
心5分钟
8.倒掉溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量
9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA
2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳
灌胶:胶中加入芡光染料< SYBR Green)
加样:质粒+上样緩冲液→混匀
电泳
结果观察:UV灯下

pHyVec4实验分析:
裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因
用碱裂解法除去杂质
1、防止DNA裂解: Solution1
1)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解
2)、所含EDTA抑制酶活性
2、溶解与变性: Solution2
1)强碱使质粒DNA和染色体DNA变性

 

pHyVec4

pHyVec4质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进

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