BIU-87/DDP人膀胱癌顺铂耐药株价格胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | BIU-87/DDP |
价格 | 来电可享受优惠 |
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人反*状腺原氨酸(3)免疫试剂盒 Human Reversei-iodothyronine,3 ELISA Kit DL-缬氨酸 DL-Valine 质量规格:>99%,BR
人泛素蛋白(Ub)ELISA检测试剂盒HumanUbiquitin,Ub 96T/48T L-亮氨酸(标准品) L-Leucine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人泛素蛋白(Ub)免疫试剂盒 Human ubiquitin,Ub ELISA Kit L-亮氨酸 L-Leucine 质量规格:>98,BR
人泛素分解酶(DUB)ELISA检测试剂盒Humandeubiquitinatingenzyme,DUB 96T/48T DL-赖氨酸 DL-Lysine 质量规格:>98%,BR
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA检测试剂盒HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAE 96T/48T DL-精氨酸盐酸盐 DL-Arginine Hydrochloride 质量规格:>98%,BR
人泛素激活酶(E1/UBAE)免疫试剂盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit 左旋肉碱;维生素BT;左卡尼汀 L(-)-Carnitine 质量规格:>98%,BR
人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA检测试剂盒HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCE 96T/48T 左卡尼汀;左旋肉碱(标准品) Levocarnitine;L(-)-Carnitine 质量规格:HPLC含量测定
人泛素结合酶E2D1(UBC4/ 5的同源物,酵母)(UBE2D1)免疫试剂盒 Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D1,UBE2D1 ELISA kit L-谷氨酸钠,一水 L-Glutamic acid monosodium salt hydrate 质量规格:>99%
人泛素结合酶E2D2(UBC4/5的同源物,酵母)(UBE2D2)免疫试剂盒 Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D2,UBE2D2 ELISA kit L-谷氨酰胺(标准品) L-Glutamine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人泛素连接酶(E3/UBPL)ELISA检测试剂盒HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPL 96T/48T 谷胱甘肽(还原型) Glutathione (Reduced);GSH 质量规格:>98%,BR
酵母β-内酰胺酶报告基因活性比色法定量检测试剂盒20 2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T)) 2-Aminoanthracene 质量规格:>98.0%(GC)(T)
ELISAKitextein人外显肽规格:48T/96T 1-氨基蒽(>98.0%(GC)(T)) 1-Aminoanthracene 质量规格:>98.0%(GC)(T)
小鼠对基苯(PABA)ELISA试剂盒 ,英文名: PABA ELISA Kit 9-蒽(>95.0%(GC)) 9-Bromoanthracene 质量规格:>95.0%(GC)
大鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA检测试剂盒Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 96T/48T 1-蒽(>97.0%(GC)) 1-Bromoanthracene 质量规格:>97.0%(GC)
人白介素18结合蛋白(IL-18BP)免疫试剂盒 Human IL-18BP ELISA Kit 2-蒽(>97.0%(GC)) 2-Bromoanthracene 质量规格:>97.0%(GC)
英文名称MouseapoB100ELISAKit小鼠载脂蛋白B100(apoB100)规格:96T/48T 9,10-双(二乙基膦甲基)蒽(>98.0%(GC)) 9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene 质量规格:>98.0%(GC)
PH8-9显色(THYMOLBLUE)指示溶液50毫升 9-蒽(>99.0%(GC)(HPLC)) 9-Bromoanthracene 质量规格:>99.0%(GC)(HPLC)
PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA试剂盒猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2--9,10-二苯基蒽(>95.0%(GC)) 2-Bromo-9,10-diphenylanthracene 质量规格:>95.0%(GC)
小鼠端粒酶关联蛋白1(TEP1)ELISA试剂盒 ,英文名: TEP1 ELISA Kit 9--10-苯基蒽(>98.0%(GC)) 9-Bromo-10-phenylanthracene 质量规格:>98.0%(GC)
人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA检测试剂盒HumanhepatitisBvirusXieractingprotein,HBXIPELISAKit 96T/48T 2-氯蒽(>98.0%(GC)) 2-Chloroanthracene 质量规格:>98.0%(GC)
DL-赖氨酸 DL-Lysine 质量规格:>98%,BR 人泛素分解酶(DUB)ELISA检测试剂盒Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit 96T/48T
DL-精氨酸盐酸盐 DL-Arginine Hydrochloride 质量规格:>98%,BR 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA检测试剂盒HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISAKit 96T/48T
左旋肉碱;维生素BT;左卡尼汀 L(-)-Carnitine 质量规格:>98%,BR 人泛素激活酶(E1/UBAE)免疫试剂盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit
左卡尼汀;左旋肉碱(标准品) Levocarnitine;L(-)-Carnitine 质量规格:HPLC含量测定 人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA检测试剂盒HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit 96T/48T
L-谷氨酸钠,一水 L-Glutamic acid monosodium salt hydrate 质量规格:>99% 人泛素结合酶E2D1(UBC4/ 5的同源物,酵母)(UBE2D1)免疫试剂盒 Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D1,UBE2D1 ELISA kit
L-谷氨酰胺(标准品) L-Glutamine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人泛素结合酶E2D2(UBC4/5的同源物,酵母)(UBE2D2)免疫试剂盒 Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D2,UBE2D2 ELISA kit
谷胱甘肽(还原型) Glutathione (Reduced);GSH 质量规格:>98%,BR 人泛素连接酶(E3/UBPL)ELISA检测试剂盒HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISAKit 96T/48T
L-谷胱甘肽(标准品) Glutathione (Reduced) 质量规格:HPLC>98%,标准品,还原型 人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA检测试剂盒HumanarylsulfataseA,ASAELISAKit 96T/48T
谷胱甘肽(氧化型) Glutathione(Oxidized) 质量规格:度大于98%,BR 人芳香烃受体(AhR)ELISA检测试剂盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T
DL-异亮氨酸 DL-Isoleucine 质量规格:>99%,BR 人芳香烃受体(AhR)免疫试剂盒 Human AhR ELISA Kit
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。