SMMC7721/FU人肝癌氟尿嘧啶耐药株说明书胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | SMMC7721/FU |
价格 | 来电可享受优惠 |
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人汉坦病毒(HV)抗体(IgM)免疫试剂盒 Human HV IgM ELISA kit Fmoc-3-(2-萘基)-D-丙氨酸 Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine 质量规格:0.98
人合成酶(NOS)ELISA检测试剂盒Humanniicoxidesyhase,NOS 96T/48T L-瓜氨酸 L-Citrulline 质量规格:>99%,BR
人和肽素(copeptin)免疫试剂盒 human copeptin ELISA kit Fmoc-L-瓜氨酸 Fmoc-L-Citrulline 质量规格:>98%,BR
人核黄素激酶(RFK)免疫试剂盒 Human RFK ELISA Kit Boc-L-β-高丙氨酸 Boc-L-β-homoalanine 质量规格:>98%,BR
人核基质蛋白22(NMP-22)ELISA检测试剂盒HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22 96T/48T Boc-L-beta-谷氨酸5-苄酯 Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester 质量规格:0.98
人核基质蛋白22(NMP-22)免疫试剂盒 Human Nuclear maix protein 22,NMP-22 ELISA Kit Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯 Fmoc-β-homoaspartic acid 质量规格:>98%,BR
人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫试剂盒 Human ai-fibrillarin aibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯 Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester 质量规格:0.98
人核糖核酸酶(RNASE)ELISA检测试剂盒Humaibonuclease,RNASE 96T/48T 高精氨酸 H-HomoArg-OH 质量规格:98%,BR,L型
人核糖核酸酶(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫试剂盒 Human ribonuclease pancreatic,RNASE1/RIB1/RNS1 ELISA kit L-羟基脯氨酸(标准品) L-Hydroxyproline 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝脏,嗜酸性粒细胞源性神经毒素)(RNASE2)免疫试剂盒 Human RNASE2 ELISA kit L-羟基脯氨酸 L-Hydroxyproline 质量规格:>99%,BR
小鼠低氧诱导因子2α(HIF2α)ELISA试剂盒 ,英文名: HIF2α ELISA Kit 酞菁锌(>95.0%(T)) Zinc Phthalocyanine 质量规格:>95.0%(T)
人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA检测试剂盒HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit 96T/48T 酞菁铁(II)(>95.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine 质量规格:>95.0%(T)
大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)免疫试剂盒 Rat Gelsolin ELISA Kit 酞菁二钠 Disodium Phthalocyanine 质量规格:
英文名称RatPaRathyroidHormone-LikeRelatedProteinELISAKit大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)规格:96T/48T 二氯酞菁锡(IV) Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride 质量规格:
酵母谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20 酞菁镁(II) Magnesium(II) Phthalocyanine 质量规格:
ELISAKitHOXB2人同源框B2规格:48T/96T 酞菁锡(II) Tin(II) Phthalocyanine 质量规格:
小鼠低氧诱导因子1α(HIF1α)ELISA试剂盒 ,英文名: HIF1α ELISA Kit 酞菁二锂(>93.0%(N)) Dilithium Phthalocyanine 质量规格:>93.0%(N)
人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA检测试剂盒Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 96T/48T 4-氨基邻苯二甲腈(>98.0%(N)) 4-Aminophthalonitrile 质量规格:>98.0%(N)
大鼠凝聚素(CLU)免疫试剂盒 Rat Clusterin,CLU ELISA Kit 4-叔丁基邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N)) 4-tert-Butylphthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC)(N)
英文名称RatPaRathyroidHormone-LikeRelatedProteinELISAKit大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)规格:96T/48T 4-丁氧基邻苯二甲腈(>95.0%(GC)) 4-Butoxyphthalonitrile 质量规格:>95.0%(GC)
Boc-L-β-高丙氨酸 Boc-L-β-homoalanine 质量规格:>98%,BR 人核黄素激酶(RFK)免疫试剂盒 Human RFK ELISA Kit
Boc-L-beta-谷氨酸5-苄酯 Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester 质量规格:0.98 人核基质蛋白22(NMP-22)ELISA检测试剂盒HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 96T/48T
Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯 Fmoc-β-homoaspartic acid 质量规格:>98%,BR 人核基质蛋白22(NMP-22)免疫试剂盒 Human Nuclear maix protein 22,NMP-22 ELISA Kit
Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯 Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester 质量规格:0.98 人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫试剂盒 Human ai-fibrillarin aibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit
高精氨酸 H-HomoArg-OH 质量规格:98%,BR,L型 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA检测试剂盒Humaibonuclease,RNASEELISAKit 96T/48T
L-羟基脯氨酸(标准品) L-Hydroxyproline 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人核糖核酸酶(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫试剂盒 Human ribonuclease pancreatic,RNASE1/RIB1/RNS1 ELISA kit
L-羟基脯氨酸 L-Hydroxyproline 质量规格:>99%,BR 人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝脏,嗜酸性粒细胞源性神经毒素)(RNASE2)免疫试剂盒 Human RNASE2 ELISA kit
L-正亮氨酸 L-Norleucine 质量规格:>98%,BR 人核糖核酸抑止剂(RNH1/PRI/RNH)免疫试剂盒 Human Ribonuclease inhibitor,RNH1/PRI/RNH ELISA Kit
Fmoc-D-4-苯丙氨酸 Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH 质量规格:HPLC>98% 人核糖体蛋白S25(RPS25)免疫试剂盒 Human ribosomal protein S25,RPS25 ELISA kit
3,5-二-L-酪氨酸 3,5-Diiodo-L-tyrosine 质量规格:BR,98% 人核糖体蛋白S9(RPS9)免疫试剂盒 Human ribosomal protein S9,RPS9 ELISA kit
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。