hct116/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株说明书胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | hct116/L |
价格 | 来电可享受优惠 |
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Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒 alpha乳香酸 HPLC≥98% 5mg
Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒 Alpha乙酸香树脂醇酯 HPLC≥98% 5mg
Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 betaD吡喃葡萄糖等效羟基氧代贝壳杉烯酸酯 HPLC≥98% 5mg
Rat thrombin receptor () ELISA Kit 大鼠凝血酶受体()ELISA试剂盒 BETA细辛脑 HPLC≥98% 5mg
Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit 大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒 beta香树精 HPLC≥98% 5mg
Rat thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒 β胸苷 HPLC≥98% 5mg
Rat thyroxine (T4) ELISA Kit 大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 Beta育亨宾 HPLC≥98% 5mg
Rat thyroxine aibody (TAb) ELISA Kit 大鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒 Corylifol A HPLC≥98% 5mg
Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒 D(+)阿拉伯糖醇 HPLC≥98% 5mg
Rat ulasensitive thyroid stimulating hormone (U-TSH) ELISA Kit 大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒 DeO甲基乙酰香兰酮色烯 HPLC≥98% 5mg
大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)免疫试剂盒 Rat urokinase plasminogen activator,uPA ELISA kit 3A-氨基-3A-脱氧-(2AS,3AS)-γ-环糊精水合物(>95.0%(HPLC)) 3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-γ-cyclodextrin Hydrate 质量规格:>95.0%(HPLC)
英文名称RatMethylaseELISAKit大鼠甲基化酶(Methylase)规格:96T/48T 6-O-α-D-麦芽糖基-β-环糊精(>98.0%(HPLC)) 6-O-α-D-Maltosyl-β-cyclodextrin 质量规格:>98.0%(HPLC)
酵母菌CSM-△LEU/△P培养基100毫升 *基-β-环糊精(>98.0%(HPLC)) Trimethyl-β-cyclodextrin 质量规格:>98.0%(HPLC)
ELISAKitiNV人套膜蛋白规格:48T/96T 三乙酰基-β-环糊精(>97.0%(HPLC)) Triacetyl-β-cyclodextrin 质量规格:>97.0%(HPLC)
小鼠蛋酸酯酶2B(PP-2B)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC)) 10,12-Heptacosadiynoic Acid 质量规格:>98.0%(GC)
Rat gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 2,4-十七二炔酸(>95.0%(T)) 2,4-Heptadecadiynoic Acid 质量规格:>95.0%(T)
HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T)) 2,4-Heneicosadiynoic Acid 质量规格:>95.0%(T)
HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISA试剂盒人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒规格:96T/48T 10,12-十七二炔酸(>97.0%(T)) 10,12-Heptadecadiynoic Acid 质量规格:>97.0%(T)
植物源性食品小麦(wheat)试剂盒20 10,12-二十九二炔酸(>97.0%(T)) 10,12-Nonacosadiynoic Acid 质量规格:>97.0%(T)
Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2,4-十九二炔酸(>97.0%(T)) 2,4-Nonadecadiynoic Acid 质量规格:>97.0%(T)
Alpha乙酸香树脂醇酯 HPLC≥98% 5mg Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒
betaD吡喃葡萄糖等效羟基氧代贝壳杉烯酸酯 HPLC≥98% 5mg Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒
BETA细辛脑 HPLC≥98% 5mg Rat thrombin receptor () ELISA Kit 大鼠凝血酶受体()ELISA试剂盒
beta香树精 HPLC≥98% 5mg Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit 大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒
β胸苷 HPLC≥98% 5mg Rat thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒
Beta育亨宾 HPLC≥98% 5mg Rat thyroxine (T4) ELISA Kit 大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
Corylifol A HPLC≥98% 5mg Rat thyroxine aibody (TAb) ELISA Kit 大鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒
D(+)阿拉伯糖醇 HPLC≥98% 5mg Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒
DeO甲基乙酰香兰酮色烯 HPLC≥98% 5mg Rat ulasensitive thyroid stimulating hormone (U-TSH) ELISA Kit 大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒
Ent,环氧基海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat urokinase (UK) ELISA Kit 大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。