HL-60/Adr人白血病阿霉素耐药株图片胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | HL-60/Adr |
价格 | 来电可享受优惠 |
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
英文名称Ratmajorhistocompatibilitycomplex大鼠组织相容性复合物(MHC)规格:96T/48T 异地氯雷他定 Iso Desloratadine 质量规格:美国进口
英文名称RatMBP大鼠髓0脂碱蛋白(MBP)规格:96T/48T N-甲基地氯雷他定 N-Methyl Desloratadine 质量规格:美国进口
英文名称RatMBP大鼠髓0脂碱蛋白(MBP)规格:96T/48T 5-羟基地氯雷他定 5-Hydroxy Desloratadine 质量规格:美国进口
英文名称RatMD2大鼠髓样分化蛋白-2(MD2)规格:96T/48T 6-羟基地氯雷他定 6-Hydroxy Desloratadine 质量规格:美国进口
英文名称RatMethylase大鼠甲基化酶(Methylase)规格:96T/48T 3-羟基地氯雷他定 3-Hydroxy Desloratadine 质量规格:美国进口
英文名称RatMethylase大鼠甲基化酶(Methylase)规格:96T/48T 地氯雷他定-d4 Desloratadine-d4 质量规格:美国进口
英文名称Ratmicroalbunminuria大鼠微量白蛋白尿(ALB)规格:96T/48T 3-羟基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷 3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
英文名称RatMMP-1——Maixmetalloproteinase-1大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)规格:96T/48T 奥司他韦酸-d3 Oseltamivir-d3 Acid 质量规格:美国进口
英文名称RatMMP-4大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)规格:96T/48T 奥司他韦酸 Oseltamivir Acid 质量规格:美国进口
英文名称RatMMP-5大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)规格:96T/48T 地布卡因 Dibucaine 质量规格:美国进口
酵母菌SD-URA培养基(半乳糖+棉籽糖)100毫升 阿昔洛韦-d4 Acyclovir-d4 质量规格:美国进口
ELISAKitPLGF人胎盘生长因子规格:48T/96T N2-乙酰基-9-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)鸟嘌呤(阿昔洛韦杂质) N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity) 质量规格:美国进口
小鼠弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 ,英文名: ELN ELISA Kit 腺苷3′,5′-环单硫代酯,8-氯-,Rp-异构体钠盐 Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, 8-Chloro-, Rp-Isomer, Sodium Salt 质量规格:美国进口
人糖化白蛋白(GA)ELISA检测试剂盒HumanGlycatedAlbumin,GAELISAKit 96T/48T L-腺苷 L-Adenosine 质量规格:美国进口
大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)免疫试剂盒 Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit 腺苷-2'-单盐 Adenosine-2'-monophosphate 质量规格:美国进口
英文名称RatCyclosporinAELISAKit大鼠环胞霉素A(CSA)规格:96T/48T 腺苷 3'-单盐水合物 Adenosine 3'-Monophosphate Hydrate 质量规格:美国进口
酵母菌YNBA培养基100毫升 腺苷胺类 Adenosine Amine Congener 质量规格:美国进口
ELISAKitPL人胎盘泌乳素规格:48T/96T 腺苷-5'-二,三钠盐 Adenosine 5'-diphposphate, trisodium salt 质量规格:美国进口
小鼠胆囊收缩素八肽(CCK8)ELISA试剂盒 ,英文名: CCK8 ELISA Kit 腺苷3‘,5’-环单钠一水合物 Adenosine 3′,5′-cyclic monophosphate sodium salt monohydrate 质量规格:美国进口
人糖化蛋白(GSP)ELISA检测试剂盒Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 96T/48T 腺苷 5‘-(α,β-亚甲基)二盐,钠盐 Adenosine 5'-(α,β-methylene)diphosphate, sodium salt 质量规格:美国进口
6-羟基地氯雷他定 6-Hydroxy Desloratadine 质量规格:美国进口 英文名称RatMD2ELISAKit大鼠髓样分化蛋白-2(MD2)规格:96T/48T
3-羟基地氯雷他定 3-Hydroxy Desloratadine 质量规格:美国进口 英文名称RatMethylaseELISAKit大鼠甲基化酶(Methylase)规格:96T/48T
地氯雷他定-d4 Desloratadine-d4 质量规格:美国进口 英文名称RatMethylaseELISAKit大鼠甲基化酶(Methylase)规格:96T/48T
3-羟基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷 3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称RatmicroalbunminuriaELISAKIT大鼠微量白蛋白尿(ALB)规格:96T/48T
奥司他韦酸-d3 Oseltamivir-d3 Acid 质量规格:美国进口 英文名称RatMMP-1——Maixmetalloproteinase-1ELISAkit大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)规格:96T/48T
奥司他韦酸 Oseltamivir Acid 质量规格:美国进口 英文名称RatMMP-4ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)规格:96T/48T
地布卡因 Dibucaine 质量规格:美国进口 英文名称RatMMP-5ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)规格:96T/48T
盐酸地布卡因-d9 Dibucaine-d9 Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatMMP-9ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)规格:96T/48T
多利培南 Doripenem 质量规格:美国进口 英文名称RatMotilinELISAKit大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
多沙普仑 Doxapram 质量规格:美国进口 英文名称RatMotilinELISAKit大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。