A549/Adr人肺癌阿霉素耐药株说明书实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | A549/Adr |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
英文名称HumanHLA-2人组织相容性抗原(HLA-2)规格:96T/48T 6β-羟基布地奈德 6β-Hydroxy Budesonide 质量规格:美国进口
英文名称HumanHRAbIgG人抗心肌抗体IgG(HRAbIgG)规格:96T/48T 亚叶酸钙水合物 Folinic acid calcium salt hydrate 质量规格:美国进口
英文名称HumanHRAbIgM人抗心肌抗体IgM(HRAbIgM)规格:96T/48T 喜树碱钠盐 Sodium Camptothecin 质量规格:美国进口
英文名称HumanIactPTH全段甲状腺素(IactPTH)规格:96T/48T 9-氨基喜树碱 9-Aminocamptothecin 质量规格:美国进口
英文名称HumanICAM-2/sCD102人细胞间粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)规格:96T/48T (R)-7-乙基喜树碱 (R)-7-Ethyl Camptothecin 质量规格:美国进口
英文名称HumanICAM-3人细胞间粘附分子-3(ICAM-3)规格:96T/48T 7-乙基-喜树碱-d3 7-Ethyl-d3-camptothecin 质量规格:美国进口
英文名称HumanIercellularadhesionmolecular1人细胞间粘附分子1(ICAM-1)(CD54)规格:96T/48T 卡培他滨-d11 Capecitabine-d11 质量规格:美国进口
英文名称HumanIerleukin-11(IL-11)人白介素-11(IL-11)规格:96T/48T 卡培他滨-2',3'-环状碳酸酯 Capecitabine-2',3'-cyclic Carbonate 质量规格:美国进口
英文名称HumanIerleukin-12(IL-12)人白介素-12(IL-12)(P40)规格:96T/48T 5'-羟基苯卡维地洛 5'-Hydroxyphenyl Carvedilol 质量规格:美国进口
英文名称HumanIerleukin-12,IL-12(P70)人白介素-12(IL-12)(P70)规格:96T/48T O-去甲卡维地洛 O-Desmethyl Carvedilol 质量规格:美国进口
酵母菌SD-LEU培养基100毫升 L-(-)-交酯(>98.0%(T)) L-(-)-Lactide 质量规格:>98.0%(T)
ELISAKitGlyCAM-1人糖基化依赖的细胞黏附分子规格:48T/96T δ-戊内酯(>98.0%(GC)) δ-Valerolactone 质量规格:>98.0%(GC)
小鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA试剂盒 ,英文名: PKCδ ELISA Kit 1,3-双(六氟-α-羟基异丙基)苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene 质量规格:>98.0%(GC)
人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA检测试剂盒Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 96T/48T 1,4-双(六氟-α-羟基异丙基)苯水合物(>97.0%(GC)) 1,4-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene Hydrate 质量规格:>97.0%(GC)
大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)免疫试剂盒 Rat brain-g peptides,BGP/Gehrelin Elisa kit 1,10-双[(4-乙氧羰基)苯氧基]癸烷 1,10-Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenoxy]decane 质量规格:
英文名称RatMMP-1——Maixmetalloproteinase-1ELISAkit大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)规格:96T/48T 1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC)) 1,4-Benzenedithiol 质量规格:>98.0%(GC)
酵母菌SD-P/HIS/ADE/LEU培养基100毫升 1,3-双[2-(4-羟苯基)-2-丙基]苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis[2-(4-hydroxyphenyl)-2-propyl]benzene 质量规格:>98.0%(GC)
ELISAKitA1c人糖化血红蛋白A1c规格:48T/96T 双(氨甲基)降莰烷(含有)(>98.0%(T)) Bis(aminomethyl)norbornane (mixture of isomers) 质量规格:>98.0%(T)
小鼠蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA试剂盒 ,英文名: PICK1 ELISA Kit 偏苯三酸酐(>95.0%(T)) Trimellitic Anhydride 质量规格:>95.0%(T)
人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA检测试剂盒Humanai-Reticulinaibody,ARAELISAKit 96T/48T 2,4-二氨基-6-异丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T)) 2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine 质量规格:>98.0%(T)
9-氨基喜树碱 9-Aminocamptothecin 质量规格:美国进口 英文名称HumanIactPTHELISAKit全段甲状腺素(IactPTH)规格:96T/48T
(R)-7-乙基喜树碱 (R)-7-Ethyl Camptothecin 质量规格:美国进口 英文名称HumanICAM-2/sCD102ELISAKit人细胞间粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)规格:96T/48T
7-乙基-喜树碱-d3 7-Ethyl-d3-camptothecin 质量规格:美国进口 英文名称HumanICAM-3ELISAKit人细胞间粘附分子-3(ICAM-3)规格:96T/48T
卡培他滨-d11 Capecitabine-d11 质量规格:美国进口 英文名称HumanIercellularadhesionmolecular1ELISAKIT人细胞间粘附分子1(ICAM-1)(CD54)ELISAKIT规格:96T/48T
卡培他滨-2',3'-环状碳酸酯 Capecitabine-2',3'-cyclic Carbonate 质量规格:美国进口 英文名称HumanIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT人白介素-11(IL-11)规格:96T/48T
5'-羟基苯卡维地洛 5'-Hydroxyphenyl Carvedilol 质量规格:美国进口 英文名称HumanIerleukin-12(IL-12)ELISAKIT人白介素-12(IL-12)(P40)规格:96T/48T
O-去甲卡维地洛 O-Desmethyl Carvedilol 质量规格:美国进口 英文名称HumanIerleukin-12,IL-12(P70)ELISAKIT人白介素-12(IL-12)(P70)规格:96T/48T
4'-羟苯基卡维地洛 4'-Hydroxyphenyl Carvedilol 质量规格:美国进口 英文名称HumanIerleukin-13,IL-13ELISAKIT人白介素-13(IL-13)规格:96T/48T
(S)-(-)-5'-苄氧基苯基卡维地洛 (S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol 质量规格:美国进口 英文名称HumanIerleukin-15,IL-15ELISAKIT人白介素-15(IL-15)规格:96T/48T
(R)-(+)-O-去甲卡维地洛 (R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol 质量规格:美国进口 英文名称HumanIerleukin-16ELISAKIT人白介素-16(IL-16)规格:96T/48T