C26-GFP荧光标记细胞株图片胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | C26-GFP |
价格 | 来电可享受优惠 |
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英文名称humanPGE1人前列腺素E1(PGE1)规格:96T/48T 5'-羧基美洛昔康 5'-Carboxy Meloxicam 质量规格:美国进口
英文名称HumanPGE2人前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氨甲基美洛昔康(美洛昔康杂质) Amido Methyl Meloxicam (Meloxicam Impurity) 质量规格:美国进口
英文名称humanPGF人前列腺素F型(PGF)规格:96T/48T 氨乙基美洛昔康(美洛昔康杂质) Amido Ethyl Meloxicam (Meloxicam Impurity) 质量规格:美国进口
英文名称HumanPhosphoinositide-3kinase人0脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)规格:96T/48T 5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康 5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam 质量规格:美国进口
英文名称HumanPhospholipidaseA2人0脂酶A2(PLA2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 甲氨蝶呤二甲基酯 Methotrexate Dimethyl Ester 质量规格:美国进口
英文名称HumanPICP人I型前胶原羧基端肽(PICP)规格:96T/48T 甲氨蝶呤-甲基-d3,二甲基酯 Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester 质量规格:美国进口
英文名称HumanPIII人III型前胶原氨基端肽(PIII)规格:96T/48T 7-羟基甲氨蝶呤 7-Hydroxy Methotrexate 质量规格:美国进口
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英文名称HumanPlasminogenactivator,urokinase(PLAU,uPA)人尿激酶型血浆酶原激活因子(PA)规格:96T/48T 4'-羟基尼美舒利 4'-Hydroxy Nimesulide 质量规格:美国进口
小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit 10-氧多烯紫杉醇 10-Oxo Docetaxel 质量规格:美国进口
鸡促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T 7-Epi-多烯紫杉醇 7-Epi-docetaxel 质量规格:美国进口
人Ⅱ型胶原代谢产物C2C(C2C)免疫试剂盒 Human Collagen Type II Cleavage,C2C ELISA Kit 6,7-环氧多烯紫杉醇 6,7-Epoxy Docetaxel(Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口
英文名称MousePICPELISAKit小鼠I型前胶原羧基端肽(PICP)规格:96T/48T 盐酸多奈哌齐-13C3 Donepezil-13C3 Hydrochloride 质量规格:美国进口
冰冻切片组织NFKAPPABP50蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 5-O-去甲多奈哌齐 5-O-Desmethyl Donepezil 质量规格:美国进口
RatCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISA试剂盒大鼠环0酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二氢多奈哌齐(非对映) Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口
小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Dehydrodeoxy多奈哌齐(多奈哌齐杂质) Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity) 质量规格:美国进口
Rat coagulation factor XIII (F x) ELISA Kit 大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒 脱氧盐酸多奈哌齐 Deoxy Donepezil Hydrochloride 质量规格:美国进口
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Humanbacterialvaginosis,BVELISA试剂盒人细菌(BV)ELISA试剂盒规格:96T/48T 6-O-去甲多奈哌齐 6-O-Desmethyl Donepezil 质量规格:美国进口
5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康 5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam 质量规格:美国进口 英文名称HumanPhosphoinositide-3kinaseELISAKit人0脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)规格:96T/48T
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咪康唑 Miconazole 质量规格:美国进口 英文名称HumanPlasminogenactivator,urokinasereceptorELISAKit人尿激酶型血浆酶原激活因子受体((PLAUR,uPAR))规格:96T/48T
麦迪霉素 Midecamycin 质量规格:美国进口 英文名称HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorELISAkit人血小板源性生长因子(PDGF-AB)规格:96T/48T
米诺地尔葡萄糖苷酸 Minoxidil Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptor,PDGFsRαELISAkit人血小板源性生长因子可溶性受体α(PDGFsRα)规格:96T/48T
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。