A549-RFP荧光标记细胞株图片实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | A549-RFP |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
公司耐药细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
英文名称Human-4人神经营养素4(-4)规格:96T/48T 4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称Human6-keto-prostaglandin人6-同-前列腺素(6-keto-prostaglandin)规格:96T/48T 4-叔丁基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-tert-Butyldiphenyl Sulfide 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称Human8-hydroxy-2-deoxyguanosine人8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)规格:96T/48T 双(4-羟苯基)硫醚(>98.0%(GC)) Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称Human8-iso-ProstaglandinF2a人8-异前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)规格:96T/48T 5,5'-硫代双水杨酸(>98.0%(GC)(T)) 5,5'-Thiodisalicylic Acid 质量规格:>98.0%(GC)(T)
英文名称humanAb人抗促甲状腺素受体抗体(Ab)规格:96T/48T 4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC)) 4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称Humanacetylcholine人乙酰胆碱(Ach)ELISA试剂盒规格:96T/48T 双[3,5-二-4-(2-羟乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC)) Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone 质量规格:>96.0%(GC)
英文名称Humanacetylcholinereceptoraibody人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 双[4-(2-羟乙氧基)苯基]砜(>97.0%(GC)) Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone 质量规格:>97.0%(GC)
英文名称HumanActininα人横纹肌辅肌动蛋白α(Actininα)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二苯砜-3,3'-二磺酸二钠盐(>95.0%(T)) Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Acid Disodium Salt 质量规格:>95.0%(T)
英文名称HumanActi-vatedproteinC人活化蛋白C规格:96T/48T 3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二酸酐(>97.0%(HPLC)(T)) 3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride 质量规格:>97.0%(HPLC)(T)
英文名称HumanActivinA人活化素A(ActivinA)规格:96T/48T 二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二钠(>98.0%(HPLC)(T)) Disodium Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
小鼠大内皮素(Big ET)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 1-去甲 格拉司琼(格拉司琼杂质B) 1-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity B) 质量规格:美国进口
Rat coagulation factor XIII (F XIII) ELISA Kit 大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒 1-甲基吲唑-3-羧酸(格拉司琼杂质D) 1-Methylindazole-3-carboxylic Acid (Granisetron Impurity D) 质量规格:美国进口
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 endo-9-甲基-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-3-胺(格拉司琼杂质F) endo-9-Methyl-9-azabicyclo[3.3.1]nonan-3-amine ( Granisetron Impurity E) 质量规格:美国进口
Humanbasicfetoprotein,BFPELISA试剂盒人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 9'-去甲格拉司琼(格拉司琼杂质C) 9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C) 质量规格:美国进口
植物脂肪酸合成酶(fattyacidsyhase)活性比色法定量检测试剂盒20 7-磺酰胺基-N-羟甲基氢氯噻嗪 7-Sulfonamido-N-hydroxymethyl Hydrochlorothiazide 质量规格:美国进口
HumaetanusAibodyELISAKit人破伤风抗体(TetanusAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T 5-氯氢氯噻嗪 5-Chloro Hydrochlorothiazide 质量规格:美国进口
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)ELISA试剂盒 ,英文名: Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit 氢氯噻嗪杂质C Hydrochlorothiazide Impurity C 质量规格:美国进口
大鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒RatCollagenaseIELISAKit 96T/48T -d6 Prednisolone-d6 质量规格:美国进口
人γ干扰素受体(IFN-γR)免疫试剂盒 Human Ierferon γ Receptor,IFN-γR ELISA Kit 6α-甲基21-醋酸盐 6α-Methylprednisolone 21-Acetate 质量规格:美国进口
英文名称MousePlatelet-DerivedGrowthFactor,PDGFELISAkit小鼠血小板源性生长因子(PDGF-AB)规格:96T/48T N-去甲伊马替尼-d8 N-Desmethyl Imatinib-d8 质量规格:美国进口
5,5'-硫代双水杨酸(>98.0%(GC)(T)) 5,5'-Thiodisalicylic Acid 质量规格:>98.0%(GC)(T) 英文名称Human8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT人8-异前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)规格:96T/48T
4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC)) 4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称humanAbELISAKIT人抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISAKIT规格:96T/48T
双[3,5-二-4-(2-羟乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC)) Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone 质量规格:>96.0%(GC) 英文名称HumanacetylcholineELISAKit人乙酰胆碱(Ach)ELISA试剂盒规格:96T/48T
双[4-(2-羟乙氧基)苯基]砜(>97.0%(GC)) Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone 质量规格:>97.0%(GC) 英文名称HumanacetylcholinereceptoraibodyELISAKit人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二苯砜-3,3'-二磺酸二钠盐(>95.0%(T)) Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Acid Disodium Salt 质量规格:>95.0%(T) 英文名称HumanActininαELISAKit人横纹肌辅肌动蛋白α(Actininα)ELISA试剂盒规格:96T/48T
3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二酸酐(>97.0%(HPLC)(T)) 3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride 质量规格:>97.0%(HPLC)(T) 英文名称HumanActi-vatedproteinCELISAKit人活化蛋白C规格:96T/48T
二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二钠(>98.0%(HPLC)(T)) Disodium Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 英文名称HumanActivinAELISAKit人活化素A(ActivinA)规格:96T/48T
双酚 C(>98.0%(GC)) 2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanAdenosineiphosphataseELISAKit人ATP酶规格:96T/48T
4,4'-异亚丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T)) 4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 英文名称HumanadiponectinELISAKit人脂联素(adiponectin)ELISAKit规格:96T/48T
四双酚A(>98.0%(GC)(T)) Tetrabromobisphenol A 质量规格:>98.0%(GC)(T) 英文名称HumanAdiponectinELISAKit人脂联素(ADT)规格:96T/48T