A375-RFP荧光标记细胞株实验报告
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

胞培养操作规程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。
（3）与血管疾病的进展和稳定有关。
变化：
（1）主动脉硬化。
（2）主动脉瘤
（3）主动脉钙化。
基本特性：
（1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。
（2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
（3）原代细胞培养末期液氮冻存。
（4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。
（5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

公司耐药细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

人活化蛋白C(APC)ELISA检测试剂盒HumanactivatedproteinC,APC 96T/48T 奥比沙星(标准品)  Orbifloxacin  质量规格：含量测定

人活化蛋白C(APC)免疫试剂盒 Human activated protein C,APC ELISA Kit 奥比沙星   Orbifloxacin  质量规格：>99%,BR

人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA检测试剂盒HumanactivatedproteinCresistance,APCR 96T/48T 醋酸胸腺肽β4   Thymosin β4 Acetate  质量规格：>95%,BR

人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)免疫试剂盒 Human activated coagulation factor Ⅻ,FⅫa ELISA Kit 2-氟-1,3-二甲基氯化咪唑翁六氟酯(DFIH)   2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate  质量规格：>98%,BR

人活化凝血因子X(FXa)免疫试剂盒 Human FXa ELISA kit 肥胖抑制素(大鼠)   OBESTATIN (RAT)  质量规格：>97%,BR

人活化素A(ACV-A)免疫试剂盒 Human Activin A,ACV-A ELISA Kit 苄索氯铵  Benzethonium Chloride  质量规格：>97%

人活化素受体样激酶1(ALK1)免疫试剂盒 Human Activin Receptor-Like Kinase 1,ALK1 ELISA Kit β-淀粉样蛋白(1-42),大鼠  β-Amyloid Peptide (1-42), rat  质量规格：>95%,BR

人活性氧(ROS)免疫试剂盒 Human Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit 血管紧张素I  Angiotensin I human acetate salt hydrate  质量规格：>97%,BR,人，醋酸盐

人饥饿激素(GHRL)免疫试剂盒 Human Ghrelin,GHRL ELISA Kit 血管紧张素III  Angiotensin III,human   质量规格：>97%,BR

人肌酐(Cr)免疫试剂盒 Human Creatinine,Cr ELISA kit 蜂毒明肽; 蜂针液明肽  Apamin   质量规格：BR,>97%
酵母细胞质粒提取试剂盒20 9-顺式-视黄酸  9-cis-Retinoic acid  质量规格：美国进口

ELISAKitAQP-1人水通道蛋白1规格：48T/96T 4-酮基13-顺式-视黄酸  4-Keto 13-cis-Retinoic Acid  质量规格：美国进口

小鼠成纤维细胞生长因子15(FGF15)ELISA试剂盒 ，英文名： FGF15 ELISA Kit 4-酮基9-顺式视黄酸  4-Keto 9-cis Retinoic Acid  质量规格：美国进口

人尿微量白蛋白(ALB)ELISA检测试剂盒Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISAKit 96T/48T 全反式4-酮基视黄酸  all-trans 4-Keto Retinoic Acid  质量规格：美国进口

大鼠0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)免疫试剂盒 Rat phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit 5,8-环氧-13-顺式视黄酸(非对映)  5,8-Epoxy-13-cis Retinoic Acid(Mixture of Diastereomers)  质量规格：美国进口

英文名称RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD)规格：96T/48T 全反式5,8-环氧视黄酸 (非对映)  all-trans 5,8-Epoxy Retinoic Acid (Mixture of Diastereomers)  质量规格：美国进口

酵母细胞周期G0期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10 去羟基比卡鲁胺  Deshydroxy Bicalutamide  质量规格：美国进口

ELISAKitAQP-0人水通道蛋白0规格：48T/96T 去氟比卡鲁胺  Desfluoro Bicalutamide  质量规格：美国进口

小鼠成纤维细胞生长因子13(FGF13)ELISA试剂盒 ，英文名： FGF13 ELISA Kit (S)-比卡鲁胺  (S)-Bicalutamide  质量规格：美国进口

人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA检测试剂盒Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit 96T/48T (R)-比卡鲁胺  (R)-Bicalutamide  质量规格：美国进口
2-氟-1,3-二甲基氯化咪唑翁六氟酯(DFIH)   2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate  质量规格：>98%,BR 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)免疫试剂盒 Human activated coagulation factor Ⅻ,FⅫa ELISA Kit

肥胖抑制素(大鼠)   OBESTATIN (RAT)  质量规格：>97%,BR 人活化凝血因子X(FXa)免疫试剂盒 Human FXa ELISA kit

苄索氯铵  Benzethonium Chloride  质量规格：>97% 人活化素A(ACV-A)免疫试剂盒 Human Activin A,ACV-A ELISA Kit

β-淀粉样蛋白(1-42),大鼠  β-Amyloid Peptide (1-42), rat  质量规格：>95%,BR 人活化素受体样激酶1(ALK1)免疫试剂盒 Human Activin Receptor-Like Kinase 1,ALK1 ELISA Kit

血管紧张素I  Angiotensin I human acetate salt hydrate  质量规格：>97%,BR,人，醋酸盐 人活性氧(ROS)免疫试剂盒 Human Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit

血管紧张素III  Angiotensin III,human   质量规格：>97%,BR 人饥饿激素(GHRL)免疫试剂盒 Human Ghrelin,GHRL ELISA Kit

蜂毒明肽; 蜂针液明肽  Apamin   质量规格：BR,>97% 人肌酐(Cr)免疫试剂盒 Human Creatinine,Cr ELISA kit

枸橼酸氯米芬,克罗米芬  Clomiphene citrate  质量规格：>98%,BR 人肌红蛋白(MYO/MB)免疫试剂盒 Human Myoglobin ELISA Kit

ML-176;SR-3335  SR3335;ML176  质量规格：>98% 人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA检测试剂盒Humaenascin-R,TN-RELISAKit 96T/48T

Semaxanib(SU-5416 )  SU5416   质量规格：>98%,VEGFR(Flk-1/KDR)抑制剂 人肌腱蛋白R(TN-R)免疫试剂盒 Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit