RM-1-RFP荧光标记细胞株说明书胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
产品名称 | |
英文名称 | RM-1-RFP |
价格 | 来电可享受优惠 |
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果菜纤维素酶解法定量检测试剂盒10 1-萘乙酮(>95%,BR) 1-Acetonaphthone 质量规格:>95%,BR
果菜乙比色法定量检测试剂盒20 1-金刚烷醇(>99%,BR) 1-Adamantanol 质量规格:>99%,BR
果类果胶化学比色法定量检测试剂盒20 1-代萘(>98%,BR) 1-Bromonaphthalene 质量规格:>98%,BR
果类果胶生物酶比色法定量检测试剂盒20 辛烷(>98%,BR) 1-Bromooctane 质量规格:>98%,BR
果蝇DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20 1-甲基咪唑(>98%,BR) 1-Methylimidazole 质量规格:>98%,BR
果蝇萃取物制备试剂盒10 1-乙基咪唑(>98%,BR) 1-Ethylimidazole 质量规格:>98%,BR
果蝇细胞冻存试剂盒50 1-萘(>98%,BR) 1-Naphthalene ethanol 质量规格:>98%,BR
果蝇细胞甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒10 乙酸-1-萘酯(>98%,BR) 1-Naphthyl acetate 质量规格:>98%,BR
果蝇细胞甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒10 二十八烷醇(>98%,BR) 1-Octacosanol 质量规格:>98%,BR
果蝇细胞培养基500毫升 1-苯基-5-巯基四氮唑(>98.5%,BR) 1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol 质量规格:>98.5%,BR
大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)免疫试剂盒 Rat Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit (R)-酮咯酸 (R)-Ketorolac 质量规格:美国进口
英文名称RatcatecholamineELISAKit大鼠儿茶酚胺(CA)规格:96T/48T (S)-兰索拉唑 (S)-Lansoprazole 质量规格:美国进口
酵母乙酰辅酶A胆乙酰转移酶(ACAT)活性荧光定量检测试剂盒20 兰索拉唑砜 Lansoprazole Sulfone 质量规格:美国进口
ELISAKitOXR人食欲素受体规格:48T/96T 13-乙基-18,19-二去甲基-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左炔诺孕酮杂质D) 13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D) 质量规格:美国进口
小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒 ,英文名: C5a ELISA Kit 13-乙基-17-羟基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左炔诺孕酮杂质B) 13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B) 质量规格:美国进口
大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA检测试剂盒Ratdopamineanspoer,DATELISAKit 96T/48T 17-去乙酰基诺孕酯 17-Desacetyl Norgestimate 质量规格:美国进口
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫试剂盒 human β2-MG ELISA Kit 左西孟坦 Levosimendan 质量规格:美国进口
英文名称MouseFBELISAKit小鼠纤维蛋白原(FB)规格:96T/48T 利奈唑酮-d3 Linezolid-d3 质量规格:美国进口
S1核酶保护法检测试剂盒5 (S)赖诺普利-d5 (S) Lisinopril-d5 质量规格:美国进口
RabbitHaptoglobin,Hpt/HPELISA试剂盒兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒规格:96T/48T (R)-赖诺普利钠盐 (R)-Lisinopril Sodium Salt 质量规格:美国进口
1-金刚烷醇(>99%,BR) 1-Adamantanol 质量规格:>99%,BR 果菜乙比色法定量检测试剂盒20
1-代萘(>98%,BR) 1-Bromonaphthalene 质量规格:>98%,BR 果类果胶化学比色法定量检测试剂盒20
辛烷(>98%,BR) 1-Bromooctane 质量规格:>98%,BR 果类果胶生物酶比色法定量检测试剂盒20
1-甲基咪唑(>98%,BR) 1-Methylimidazole 质量规格:>98%,BR 果蝇DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20
1-乙基咪唑(>98%,BR) 1-Ethylimidazole 质量规格:>98%,BR 果蝇萃取物制备试剂盒10
1-萘(>98%,BR) 1-Naphthalene ethanol 质量规格:>98%,BR 果蝇细胞冻存试剂盒50
乙酸-1-萘酯(>98%,BR) 1-Naphthyl acetate 质量规格:>98%,BR 果蝇细胞甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒10
二十八烷醇(>98%,BR) 1-Octacosanol 质量规格:>98%,BR 果蝇细胞甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒10
1-苯基-5-巯基四氮唑(>98.5%,BR) 1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol 质量规格:>98.5%,BR 果蝇细胞培养基500毫升
新戊二醇(>98%,BR) 2,2-Dimethyl-1,3-propanediol 质量规格:>98%,BR 果蝇直接法PCR扩增试剂盒50
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。