荧光探针法检测原理:
荧光PCR简述:点击了解更多公司产品。
犬科研PCR检测试剂盒说明书定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化,通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法:荧光探针法和荧光染料法。
产品名称 | 犬科研PCR检测试剂盒说明书 |
英文名称 | Canine Corona Virus(CCoV)RTPCR |
编号 | GOY-01P249 |
荧光PCR如何实现实时监控的呢?
Ø 犬科研PCR检测试剂盒说明书 PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分(检测器、激发光源、热循环模块)
Ø 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据,用于实验结果的分析
ARMS检测方法;1个SNP位点设计双管反应,含目的基因检测及内参检测双通道。
犬科研PCR检测试剂盒说明书运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时,由于其浓度较
高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作
自备试剂 DNA 模板
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对
照管、另一个用作样品制备阴性对照管。如果用本试剂盒自带的天净沙 DNA 释放剂试用装。则按下面。
步骤操作:
3. 犬科研PCR检测试剂盒说明书配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足够 10 个样品)为例:在一干净塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水,充分混合均匀即可。溶液 A 工作液可室温放置,但在一周内用完,不要长期放置。一
次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足够 10 个样品。如果待测样品数量为其他数字,配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。
4. 在标记好的 N+2 个离心管中,加入 1-5mg 固体样品(半粒芝麻大小)或 5uL 液体样品待测样品。在样品制备阳性对照中加入 5uL 阳性对照,在样品制备阴性对照中加入 5uL 水。
5. 在每个管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,确保固体样品被溶液淹埋,如果是液体样品则震荡混匀。
6. 95℃保温 10 分钟。
7. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得 DNA 释放液。每个样品得到的 DNA释放液足够进行 50-100 次 PCR。
反应五要素:
犬科研PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
氧星 CAS 82419-36-1 订购|咨询 规格: 100mg
百部(直立百部) CAS 订购|咨询 规格: 1g
大黄素;莲甲素 CAS 订购|咨询 规格: HPLC≥98%,40mg/支
银杏酚酸;Ginkgolic acids CAS 订购|咨询 规格: 20mg
原碱;Hydroprotopin CAS 128397-41-1 订购|咨询 规格: 20mg
番泻苷元B;Sennidin B CAS 517-44-2 订购|咨询 规格: 20mg
酪醇 CAS 501-94-0 订购|咨询 规格: 20mg
三七皂苷Ft1 CAS 订购|咨询 规格: 20mg
2-金刚烷 CAS 700-58-3 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg
对乙酰氨基酚 CAS 103-90-2 订购|咨询 规格: HPLC≥99%;100mg
拟人参皂苷F11 CAS 69884-00-0 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg
氢噻嗪 CAS 58-93-5 订购|咨询 规格: 100mg
犬科研PCR检测试剂盒说明书PDZD8 PDZ结构域PDZK8蛋白抗体 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗水貂IgG 0.1ml
CDKAL1 周期素依赖性激酶5调节蛋白1样蛋白1抗体 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的驴抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-human IgG/PE PE标记的羊抗人IgG 0.1ml
GDNF Receptor alpha 2 胶质细胞系源性神经营养因子受体α2抗体 0.1ml
Phospho-PLC γ1 (Tyr783) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗体 0.1ml
Nav1.5/SCN5A 电压门控钠通道5α抗体 0.2ml
phospho-ESPL1 (Ser1073) 磷酸化外纺锤体极样蛋白1抗体 0.1ml
phospho-NIPA(Ser354) 磷酸化间变性淋巴瘤激酶核相互作用伴侣蛋白抗体 0.1ml
VAM1/MPP6 棕榈酰化膜蛋白6抗体 0.2ml
SLC12A3/NCCT 钠氯离子转运蛋白抗体 0.2ml