细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品名称 | |
英文名称 | Bxpc3/DDP |
价格 | 来电可享受优惠 |
胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
实验报告
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
英文名称MouseNF-kB小鼠NF-kB规格:96T/48T (S)-布洛芬 (S)-Ibuprofen 质量规格:美国进口
英文名称Mouseniicoxidesyhase小鼠合成酶(NOS)规格:96T/48T 依那普利 Enalapril 质量规格:美国进口
英文名称MouseNN-T4小鼠新生甲状腺素(NN-T4)规格:96T/48T 1,3-二苄基-5-氟尿嘧啶 1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil 质量规格:美国进口
英文名称MouseNO小鼠(NO)ELISA规格:96T/48T 1,3-二(苄氧基甲基)-5-氟尿嘧啶 1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil 质量规格:美国进口
英文名称MouseOncostatinM,OSM小鼠抑瘤素M(OSM)规格:96T/48T 5-氟乳清酸水合物 5-Fluoroorotic acid hydrate 质量规格:美国进口
英文名称MouseOsteopoin,OPN小鼠OPN规格:96T/48T 5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶 5-Fluoro-1,3-dimethyluracil 质量规格:美国进口
英文名称MouseOxLDL小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)规格:96T/48T 5-氟尿嘧啶核苷 5-Fluorouridine 质量规格:美国进口
英文名称MouseP53小鼠P53(P53)ELISA试剂盒规格:96T/48T 5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 质量规格:美国进口
英文名称MousePAF小鼠血小板活化因子(PAF)规格:96T/48T 舒马曲坦-d6 Sumatriptan-d6 质量规格:美国进口
英文名称MousePAI-1小鼠纤溶酶原激活剂抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 舒马曲坦-d6琥珀酸盐 Sumatriptan-d6 Succinate 质量规格:美国进口
DNA橙(acridineorange)荧光检测试剂盒50 S(-)-盐酸心得安 S(-)-Propranolol • HCl 质量规格:美国进口
ELISAKi-4人神经营养因子4规格:48T/96T 雷洛昔芬-d4 Raloxifene-d4 质量规格:美国进口
小鼠苯(LPA)ELISA试剂盒 ,英文名: LPA ELISA Kit 雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸 Raloxifene 6-Glucuronide 质量规格:美国进口
大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA检测试剂盒RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit 96T/48T 雷洛昔芬4'-葡萄糖苷酸 Raloxifene 4'-Glucuronide 质量规格:美国进口
人α-辅肌动蛋白1(ACTN-1)免疫试剂盒 Human ACTN-1 ELISA Kit 雷洛昔芬6,4'-二-β-D-葡萄糖苷酸 Raloxifene 6,4'-Bis-β-D-glucuronide 质量规格:美国进口
英文名称MouseHCYELISAKit小鼠同型半胱氨(HCY)规格:96T/48T N10-单一去甲基利扎曲坦 N10-Monodesmethyl Rizatriptan 质量规格:美国进口
SYBR绿色荧光核酸染色试剂盒(配制25毫升/)10 利扎曲坦N10-氧化物 Rizatriptan N10-Oxide 质量规格:美国进口
rabbitiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISA试剂盒兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒规格:96T/48T 17-去乙酰罗库铵 17-Desacetyl Rocuronium 质量规格:美国进口
小鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA试剂盒 ,英文名: SOD3 ELISA Kit N-去甲基罗红霉素 N-Demethyl Roxithromycin 质量规格:美国进口
人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA检测试剂盒Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 96T/48T 外消旋盐酸舍曲林-d3 rac Sertraline-d3 Hydrochloride 质量规格:美国进口
Bxpc3/DDP人胰腺肿瘤顺铂耐药株图片1,3-二(苄氧基甲基)-5-氟尿嘧啶 1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil 质量规格:美国进口 英文名称MouseNOELISAKit小鼠(NO)ELISA规格:96T/48T
5-氟乳清酸水合物 5-Fluoroorotic acid hydrate 质量规格:美国进口 英文名称MouseOncostatinM,OSMELISAKIT小鼠抑瘤素M(OSM)规格:96T/48T
5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶 5-Fluoro-1,3-dimethyluracil 质量规格:美国进口 英文名称MouseOsteopoin,OPNELISAkit小鼠OPN规格:96T/48T
5-氟尿嘧啶核苷 5-Fluorouridine 质量规格:美国进口 英文名称MouseOxLDLELISAKit小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)规格:96T/48T
5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 质量规格:美国进口 英文名称MouseP53ELISAKit小鼠P53(P53)ELISA试剂盒规格:96T/48T
舒马曲坦-d6 Sumatriptan-d6 质量规格:美国进口 英文名称MousePAFELISAKIT小鼠血小板活化因子(PAF)规格:96T/48T
舒马曲坦-d6琥珀酸盐 Sumatriptan-d6 Succinate 质量规格:美国进口 英文名称MousePAI-1ELISAKit小鼠纤溶酶原激活剂抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
双氯芬酸甲酯 Diclofenac Methyl Ester 质量规格:美国进口 英文名称MousePAIELISAKit小鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)规格:96T/48T
双氯芬酸酰胺 Diclofenac Amide 质量规格:美国进口 英文名称MousePAPELSIAKit小鼠纤溶酶-抗纤溶酶复合物检测(PAP)规格:96T/48T
芴甲氧羰基-加巴喷丁 Fmoc-Gabapentin 质量规格:美国进口 英文名称MousePCNAELISAKit小鼠增殖细胞抗原(PCNA)规格:96T/48T
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