SK-MES-1/DDP人肺鳞癌顺铂耐药株实验报告
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

胞培养操作规程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。
（3）与血管疾病的进展和稳定有关。
变化：
（1）主动脉硬化。
（2）主动脉瘤
（3）主动脉钙化。
基本特性：
（1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。
（2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
（3）原代细胞培养末期液氮冻存。
（4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。
（5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

公司耐药细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

饮料氟元素比色法定量检测试剂盒20 10,12-二十五二炔酸(>97.0%(GC)(T))  10,12-Pentacosadiynoic Acid  质量规格：>97.0%(GC)(T)

饮料甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20 2,4-十五二炔酸(>97.0%(T))  2,4-Pentadecadiynoic Acid  质量规格：>97.0%(T)

饮料果胶化学比色法定量检测试剂盒20 10,12-二十三联炔酸(>98.0%(GC)(T))  10,12-Tricosadiynoic Acid  质量规格：>98.0%(GC)(T)

饮料环氨酸(cyclamate)含量薄层色谱法定性检测试剂盒20 1,4-双(*基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))  1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne  质量规格：>99.0%(GC)

饮料环氨酸(cyclamate)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20 1-代丁炔(含稳定剂铜屑)(>98.0%(GC))  1-Butynyl Iodide (stabilized with Copper chip)  质量规格：>98.0%(GC)

饮料精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒20 3-氯-1-丁炔(>98.0%(GC))  3-Chloro-1-butyne  质量规格：>98.0%(GC)

饮料精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒20 2,4-己二炔-1,6-二醇(>99.0%(GC))  2,4-Hexadiyne-1,6-diol  质量规格：>99.0%(GC)

饮料抗坏血酸比色法定量检测试剂盒20 10,12-二十五碳二炔-1-醇(>98.0%(GC))  10,12-Pentacosadiyn-1-ol  质量规格：>98.0%(GC)

饮料离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒20 1-代戊炔(>97.0%(GC))  1-Pentynyl Iodide  质量规格：>97.0%(GC)

饮料镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒20 1-代-1-丙炔(>97.0%(GC))  1-Iodo-1-propyne  质量规格：>97.0%(GC)
精浆中性α-糖苷酶(α-glucosidase)活性比色法定量检测试剂盒20 二氢酮洛芬(非对映)  Dihydro Ketoprofen (Mixture of Diastereomers)  质量规格：美国进口

ELISAKitADRA1A人能a1A受体规格：48T/96T 二氢酮洛芬β-D-葡萄糖苷酸,非对映  Dihydro Ketoprofen β-D-Glucuronide, Mixture of Diastereomers  质量规格：美国进口

小鼠表皮调节素(EREG)ELISA试剂盒 ，英文名： EREG ELISA Kit 来氟米特3-异构体  Leflunomide 3-Isomer  质量规格：美国进口

人富组蛋白(histatin5)ELISA检测试剂盒Humanhistatin5ELISAKit 96T/48T 去甲基盐酸左氧氟沙星  Desmethyl Levofloxacin Hydrochloride  质量规格：美国进口

大鼠可溶性白介素-2 受体(sIL-2R)免疫试剂盒 Rat soluble ierleukin-2 receptor,sIL-2R ELISA Kit 左氧氟沙星  Levofloxacin  质量规格：美国进口

英文名称RatPRLELISAKit大鼠催乳素(PRL)规格：96T/48T 左氧氟沙星-d8  Levofloxacin-d8  质量规格：美国进口

粒性白细胞染色试剂盒50 5-羟基氯诺昔康  5-Hydroxy Lornoxicam  质量规格：美国进口

ELISAKitADRA1A人能a1A受体规格：48T/96T 氯诺昔康-d4  Lornoxicam-d4  质量规格：美国进口

小鼠表皮生长因子受体2(EGFR2)ELISA试剂盒 ，英文名： EGFR2 ELISA Kit N2-洛沙坦-洛沙坦(洛沙坦杂质)  N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)  质量规格：美国进口

人颗粒溶素(granulysin)ELISA检测试剂盒HumangranulysinELISAKit 96T/48T N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦杂质H)  N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)  质量规格：美国进口
1,4-双(*基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))  1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne  质量规格：>99.0%(GC) 饮料环氨酸(cyclamate)含量薄层色谱法定性检测试剂盒20

1-代丁炔(含稳定剂铜屑)(>98.0%(GC))  1-Butynyl Iodide (stabilized with Copper chip)  质量规格：>98.0%(GC) 饮料环氨酸(cyclamate)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20

3-氯-1-丁炔(>98.0%(GC))  3-Chloro-1-butyne  质量规格：>98.0%(GC) 饮料精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒20

2,4-己二炔-1,6-二醇(>99.0%(GC))  2,4-Hexadiyne-1,6-diol  质量规格：>99.0%(GC) 饮料精氨酸(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒20

10,12-二十五碳二炔-1-醇(>98.0%(GC))  10,12-Pentacosadiyn-1-ol  质量规格：>98.0%(GC) 饮料抗坏血酸比色法定量检测试剂盒20

1-代戊炔(>97.0%(GC))  1-Pentynyl Iodide  质量规格：>97.0%(GC) 饮料离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒20

1-代-1-丙炔(>97.0%(GC))  1-Iodo-1-propyne  质量规格：>97.0%(GC) 饮料镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒20

1-(*基硅基)-1-丙炔(>98.0%(GC))  1-(Trimethylsilyl)-1-propyne  质量规格：>98.0%(GC) 饮料尿素比色法定量检测试剂盒20

22-二十三碳烯酸(>95.0%(GC)(T))  22-Tricosenoic Acid  质量规格：>95.0%(GC)(T) 饮料乙酸比色法定量检测试剂盒20

10-十一碳炔酸(>95.0%(T))  10-Undecynoic Acid  质量规格：>95.0%(T) 饮料总乳酸比色法定量检测试剂盒20