SGC7901/DDP人胃癌顺铂耐药株胞培养操作规程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。
（3）与血管疾病的进展和稳定有关。
变化：
（1）主动脉硬化。
（2）主动脉瘤
（3）主动脉钙化。
基本特性：
（1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。
（2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
（3）原代细胞培养末期液氮冻存。
（4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。
（5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

实验报告
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

公司耐药细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

小鼠周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA试剂盒 ，英文名： CDKN2A ELISA Kit 4-二甲基氨基-4'-硝基茋(>98.0%(HPLC)(T))  4-Dimethylamino-4'-nitrostilbene  质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

小鼠轴突生长诱向因子1(n1)ELISA试剂盒 ，英文名： n1 ELISA Kit 4-甲氧基-4'-硝基芪(>98.0%(GC))  4-Methoxy-4'-nitrostilbene  质量规格：>98.0%(GC)

小鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 ，英文名： MBP ELISA Kit 5-硝基尿嘧啶(>99.0%(HPLC)(T))  5-Nitrouracil  质量规格：>99.0%(HPLC)(T)

小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA试剂盒 ，英文名： MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit 5-硝基吲哚(>98.0%(GC))  5-Nitroindole  质量规格：>98.0%(GC)

小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)ELISA试剂盒 ，英文名： MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit 铝酞菁(>98.0%(T))  Phthalocyanine Chloroaluminum  质量规格：>98.0%(T)

小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA检测试剂盒Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ 96T/48T 酞菁铁(II)(升华提)(>98.0%(T))  Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)  质量规格：>98.0%(T)

小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA检测试剂盒Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ 96T/48T 酞菁(>93.0%(N))  Phthalocyanine  质量规格：>93.0%(N)

小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA试剂盒 ，英文名： MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit 颜料蓝15,酞菁蓝B  Pigment Blue 15  质量规格：

小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA检测试剂盒Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-α 96T/48T 颜料绿 7  Pigment Green 7  质量规格：

小鼠转化生长因子α(TGFα)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFα ELISA Kit 酞菁铅(II)(>95.0%(T))  Lead(II) Phthalocyanine  质量规格：>95.0%(T)
小鼠单酰辅酶A(malonyl CoA)ELISA试剂盒 ，英文名： malonyl CoA ELISA Kit 阿奇霉素  Azithromycin  质量规格：美国进口

大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T 阿奇霉素-d3  Azithromycin-d3  质量规格：美国进口

人α-内肽(α-EP)免疫试剂盒 Human α-Endomorphin,α-EP ELISA Kit Δ6,7-巴卡丁 III  Δ6,7-Baccatin III  质量规格：美国进口

英文名称Mouseercellularadhesionmolecular1,ICAM-1,CD54ELISAKIT小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)规格：96T/48T 10-去乙酰巴卡丁III  10-Deacetylbaccatin-III  质量规格：美国进口

SiRNA完整表达文库构建技术试剂盒5 7-O-（三乙基硅基）-10-去乙酰巴卡丁III  7-O-(Triethylsilyl)-10-deacetyl Baccatin III   质量规格：美国进口

rabbitImmunoglobulinE,IgEELISA试剂盒兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒规格：96T/48T Δ6,7-巴卡丁III  Δ6,7-Baccatin III  质量规格：美国进口

小鼠单核细胞趋化蛋白5(MCP5)ELISA试剂盒 ，英文名： MCP5 ELISA Kit R-(+)-巴氯芬盐酸盐  R-(+)-Baclofen hydrochloride  质量规格：美国进口

人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA检测试剂盒Humancytokeratinfragmeaigen21-1,CYFRA21-1ELISAKit 96T/48T 倍氯米松  Beclomethasone  质量规格：美国进口

大鼠膜相关0脂酶A2(PLA2G2A)免疫试剂盒 Rat Phospholipase A2, membrane associated,PLA2G2A ELISA kit 苯佐卡因-d4  Benzocaine-d4  质量规格：美国进口

英文名称Ratai-melanocyteELISAKit大鼠黑色素细胞抗体(melanocyte)规格：96T/48T 盐酸苯达莫司汀-d5  Bendamustine-d5 (major) Hydrochloride  质量规格：美国进口
5-硝基吲哚(>98.0%(GC))  5-Nitroindole  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA试剂盒 ，英文名： MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit

铝酞菁(>98.0%(T))  Phthalocyanine Chloroaluminum  质量规格：>98.0%(T) 小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)ELISA试剂盒 ，英文名： MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit

酞菁铁(II)(升华提)(>98.0%(T))  Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)  质量规格：>98.0%(T) 小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA检测试剂盒Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit 96T/48T

酞菁(>93.0%(N))  Phthalocyanine  质量规格：>93.0%(N) 小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA检测试剂盒Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISAKit 96T/48T

颜料蓝15,酞菁蓝B  Pigment Blue 15  质量规格： 小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA试剂盒 ，英文名： MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit

颜料绿 7  Pigment Green 7  质量规格： 小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA检测试剂盒Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 96T/48T

酞菁铅(II)(>95.0%(T))  Lead(II) Phthalocyanine  质量规格：>95.0%(T) 小鼠转化生长因子α(TGFα)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFα ELISA Kit

酞菁锌(>95.0%(T))  Zinc Phthalocyanine  质量规格：>95.0%(T) 小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 ，英文名： TGF-α ELISA Kit

酞菁铁(II)(>95.0%(T))  Iron(II) Phthalocyanine  质量规格：>95.0%(T) 小鼠转化生长因子β(TGFβ1)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFβ1 ELISA Kit

酞菁二钠  Disodium Phthalocyanine  质量规格： 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAkit 96T/48T

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。