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| D/L-乳酸快速检测试剂盒（D-/L-Lactic Acid （D-/L-Lactate） （Rapid） Assay Kit 规格：100次（各50次） 爱尔兰 型号:JKY/K-DLATE | 库号：M245872 | D/L-乳酸快速检测试剂盒（D-/L-Lactic Acid （D-/L-Lactate） （Rapid） Assay Kit 规格：100次（各50次） 爱尔兰JKY/K-DLATE更多信息>>> |
| 名称：D/L-乳酸检测试剂盒 产品货号：K-DLATE 规格：100（各50） 产地：爱尔兰 数量：大量 英文名：D/L-Lactic Acid Assay Kit 保存条件：4-6摄氏度 保质期：1年以上 外观 七玻璃瓶 比重 不适用 在水中的溶解度 易溶 pH值 7.0 气味 无 粉末和液体形式 性 （冷冻）5年或以上 成分: 名称 比例 甘氨酰甘氨酸缓冲液 1瓶（玻璃） 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 2瓶（玻璃） Ḏ-谷氨酸丙酮酸转氨酶 1瓶（玻璃） L -乳酸脱氢酶酶 1瓶（玻璃） D -乳酸脱氢酶酶 1瓶（玻璃） L -乳酸的标准解决方案1瓶（玻璃） 详细信息 引言: 许多食品和饮料中都发现有D-乳酸和L-乳酸。由乳酸菌产生，D-乳酸和L-乳酸存在于牛奶的发酵产品中比如酸奶和奶酪，以及腌菜，腌肉和腌鱼中。L-乳酸被广泛添加入食品和饮料（E270）中，用作不挥发的酸化剂以增加酸味。在蛋品厂，L-乳酸可作为质量指标，如果过了200mg/kg那么表示存在由于污染孵化导致的腐败。类似地，也可以通过检测D-乳酸和L-乳酸含量确定牛奶和果汁的质量。在葡萄酒生产中，苹果乳酸的发酵也可以通过随后的L-苹果酸水平下降和L-乳酸水平增加监测。D-乳酸的产生标志着酒被乳酸菌腐败。在化工业中，D-乳酸和L-乳酸都是化合物生产过程中的原材料，例如聚交酯和一些可生物降解的聚合物，同时也应用在化妆品和医药品生产中。 原理: D-乳酸的定量分析需要两步酶化反应。 *个反应由D-乳酸脱氢酶（D-LDH）催化,D-乳酸在烟酰腺嘌呤二核苷酸（NAD+）的存在下，被氧化成丙酮酸（1）。 （D-LDH） （1） D-乳酸 + NAD+ 丙酮酸 + NADH + H+ （D—GPT） 然而, 因为反应（1）的平衡和D-乳酸和NAD+有着密切的关系，进一步反应需要消耗产生的丙酮酸 在大量D-谷氨酸的存在下，通过D-谷氨酸-丙酮酸转氨酶（D-GPT）的作用把丙酮酸转化为D-丙胺酸和2-酮戊二酸（2）。 （2）丙酮酸+D-谷氨酸 D-丙胺酸和2-酮戊二酸 以上两个反应中产生的 NADH 的量可以用来计量D-乳酸的量。 NADH的量通过340nm处增加的吸光率来测量。 在相似的反应中，由L-乳酸脱氢酶（D-LDH）（3）催化，L-乳酸在烟酰腺嘌呤二核苷酸（NAD+）的存在下，被氧化成丙酮酸（3） （L-LDH） （3） L-乳酸 + NAD+ 丙酮酸 + NADH + H+ 在大量D-谷氨酸的存在下，通过D-谷氨酸-丙酮酸转氨酶（D-GPT）的作用把丙酮酸再次被转化为D-丙胺酸和2-酮戊二酸（2）。D-乳酸和L-乳酸可以被连续测定，在这个分析方法中，它们被分别进行但它们可以同时孵育，这样减少了总反应时间。 特异性，灵敏度，线性和精确性 此方法特异性检测D-乳酸和L-乳酸。在D-乳酸锂（MW=96.0）的检测中，大约可以预期结果为96%（W/W），L-乳酸锂可以得到98%（W/W）。 检测的灵敏度为0.005 个吸光度单位。相当于样品zui大体积为1.50 mL 时，样品浓度为0.107 mg/L（或者 1.60 mg/L ，样品体积0.1 mL） 。检测限为 0.214 mg/L，这是在0.010的吸光度差异，样品zui大体积为1.50 mL为得到的 。 D-乳酸和L-乳酸检测的线性变化为0.5 到 30 μg 。在重复测定中，同一份样品溶液，可能产生0.005 到 0.010 个吸光光度值的差异。这相当于样品1.50 mL，样品溶液中D-乳酸和L-乳酸的浓度为0.107 到 0.214 mg/L 。如果样品在制备阶段被稀释过,结果要乘以稀释倍数F。如果样品制备阶段，称量过样品，比如10 g/L，可能会产生0.02 到 0.05 g/100 g 的差异。 干扰: 如果D-乳酸和L-乳酸的转换在实验的时间内（D-乳酸大约5分钟，L-乳酸大约10分钟）*完成，通常认为是没有发生任何干扰。不过，这个也可以进一步验证，通过在实验的完成时，向比皿中加入D-乳酸和L-乳酸混合物（大约每0.1mL分别为15ug），吸光光度值有会明显增加。 样品中的干扰物质的分析可以通过加入一个内参来确定。需要进行一个标准品定量回收实验，通过这个回收实验（也是在zui初的提取步骤中向样品中加入D-乳酸或L-乳酸）可以算出样品在处理和提取过程中的损失量。 安全: D-乳酸和L-乳酸检测中用到的试剂没有有毒物质。不过浓缩缓冲液中含有*（0.02 % w/v）作为防腐剂。这个通常需要按照有毒物质的安全操作流程进行试验。 试剂盒: D-乳酸和L-乳酸检测试剂盒可以进行50次试验，并提供所有的实验方法。 瓶 1（×2）: 双甘氨肽缓冲液 （25 mL，0.5 M，pH 10.0） 和D-谷氨酸 （0.5 M） 和* （0.02 % w/v）作为防腐剂 4°C保存，性>2年。. 瓶 2（×2）: NAD+ （380 mg）。-20°C保存，性>5年。. 瓶 3 : D-谷氨酸-丙酮酸转氨酶悬浮液（1.1 mL， 1,300 U/mL）. 4°C保存，性>2年 瓶4 ：L-乳酸脱氢酶悬浮液（1.1 mL，20,000 U/mL）。4°C保存，性>2年。 瓶5 ：D-乳酸脱氢酶悬浮液（1.1 mL，20,000 U/mL）。4°C保存，性>2年。 瓶6 ：D-乳酸/L-乳酸标准溶液 （每个5 mL， 0.15 mg/mL） ，0.02 % （w/v） *。4°C保存，性>2年 D-/L-Lactic Acid （D-/L-Lactate） （Rapid） For the rapid and specific and rapid concurrent assay of L-lactic acid （L-lactate） and D-lactic acid （D-lactate） in beverages, meat, dairy and food products. （100 determinations per kit; 50 of each）. Catalogue Number: K-DLATE Content: 100 assays [50 of each] per kit Appearance Seven glass vials. Specific Gravity not applicable Solubility in Water Readily soluble. pH Value 7.0 Odour none Form powders and liquids Stability stable in a freezer for five or more years Ingredients Name CAS Proportion Glycylglycine buffer 1 vial （glass） Nicotinamide adenine dinucleotide 2 vials （glass） D-Glutamate pyruvate transaminase enzyme 1 vial （glass） L-Lactate Dehydrogenase enzyme 1 vial （glass） D-Lactate Dehydrogenase enzyme 1 vial （glass） L-Lactic acid standard solution 1 vial （glass） INTRODUCTION: D- and L-lactic acid are found in many foods and beverages. Produced naturally by lactic acid bacteria, D- and L-lactic acid are found in many fermented milk products such as yoghurt and cheese, and also in pickled vegetables, and cured meats and fish. L-Lactic acid is supplemented into foods and beverages （E270） where a tart flavour is desired, and is widely used as a non-volatile acidulant. In the egg industry, L-lactic acid is a quality indicator, where levels above 200 mg/kg indicate spoilage by contamination or incubation. Similarly, the quality of milk and fruit juice can be established by measurement of the D- and L-lactic acid content. In the wine industry, the course of malolactic fermentation is monitored by following the falling level of L-malic acid, and the increasing level of L-lactic acid. The production of D-lactic acid can indicate wine spoilage. In the chemical industry, both D- and L-lactic acid are raw materials in the production of compounds such as polylactides and biologically degradable polymers, and applications also exist for these acids in cosmetics and pharmaceuticals. PRINCIPLE: The quantification of D-lactic acid requires two enzyme reactions. In the first reaction catalysed by D-lactate dehydrogenase （D-LDH）, D-lactic acid （D-lactate） is oxidised to pyruvate in the presence of nicotinamide-adenine dinucleotide （NAD+） （1）. （D-LDH） （1） D-Lactate + NAD+ pyruvate + NADH + H+ However, since the equilibrium of reaction （1） lies firmly in the favour of D-lactic acid and NAD+, a further reaction is required to “trap” the pyruvate product. This is achieved by the conversion of pyruvate to D-alanine and 2-oxoglutarate, with the enzyme D-glutamate-pyruvate transaminase （D-GPT） in the presence of a large excess of D-glutamate （2）. （D-GPT） （2） Pyruvate + D-glutamate D-alanine + 2-oxoglutarate The amount of NADH formed in the above coupled reaction is stoichiometric with the amount of D-lactic acid. It is the NADH which is measured by the increase in absorbance at 340 nm. In a similar set of reactions, L-lactic acid （L-lactate） is oxidised to pyruvate by L-lactate dehydrogenase （L-LDH） （3） in the presence of nicotinamide-adenine dinucleotide （NAD+）. 1 （L-LDH） （3） L-Lactate + NAD+ pyruvate + NADH + H+ Pyruvate is again “trapped” using D-GPT in the presence of a large excess of D-glutamate （2）. While the assays for D-lactic acid and L-lactic acid can be performed sequentially, in the current format they are performed separay as this allows the incubations to be performed concurrently and thus gives a significant reduction in total reaction time. SPECIFICITY, SENSITIVITY, LINEARITY AND PRECISION: The assays are specific for either D-lactic acid or L-lactic acid. In the assay of lithium D-lactate （MW = 96.0） results of approx. 96 % （w/w） can be expected, while a value of 98 % （w/w） should be obtained with lithium L-lactate. The smallest differentiating absorbance for the assay is 0.005 absorbance units. This corresponds to 0.107 mg/L of sample solution at the maximum sample volume of 1.50 mL （or to 1.60 mg/L with a sample volume of 0.1 mL）. The detection limit is 0.214 mg/L, which is derived from an absorbance difference of 0.010 and the maximum sample volume of 1.50 mL. The assay is linear over the range of 0.5 to 30 μg of D- or L-lactic acid per assay. In duplicate determinations using one sample solution, an absorbance difference of 0.005 to 0.010 may occur. With a sample volume of 1.50 mL, this corresponds to a D-/L-lactic acid concentration of approx. 0.107 to 0.214 mg/L of sample solution. If the sample is diluted during sample preparation, the result is multiplied by the dilution factor, F. If in sample preparation, the sample is weighed, e.g. 10 g/L, a difference of 0.02 to 0.05 g/100 g can be expected. INTERFERENCE: If the conversion of D- and L-lactic acid has been completed within the times specified in the assay （D-lactic acid, approx. 5 min; L-lactic acid, approx. 10 min）, it can be generally concluded that no interference has occurred. However, this can be further checked by adding a D-/L-lactic acid mixture （15 μg of each in 0.1 mL） to the cuvette on completion of the reaction. A significant increase in the absorbance should be observed. Interfering substances in the sample being analysed can be identified by including an internal standard. Quantitative recovery of this 2 standard would be expected. Losses in sample handling and extraction are identified by performing recovery experiments i.e. by adding D-lactic acid or L-lactic acid to the sample in the initial extraction steps. SAFETY: The reagents used in the determination of D- and L-lactic acid are not hazardous materials in the sense of the Hazardous Substances Regulations. However, the buffer concentrate contains sodium azide （0.02 % w/v） as a preservative. The general safety measures that apply to all chemical substances should be adhered to. KITS: Kits suitable for performing 50 concurrent determinations of both D- and L-lactic acid are available from Megazyme. The kits contain the full assay method plus: Bottle 1: （x2） Glycylglycine buffer （25 mL, 0.5 M, pH 10.0） plus D-glutamate （0.5 M） and sodium azide （0.02 % w/v） as a preservative. Stable for > 2 years at 4°C. Bottle 2: （x2） NAD+ （380 mg）. Stable for > 5 years at -20°C. Bottle 3: D-Glutamate-pyruvate transaminase suspension （2.2 mL, 1,300 U/mL）. Stable for > 2 years at 4°C. Bottle 4: L-Lactate dehydrogenase suspension （1.1 mL, 2,000 U/mL）. Stable for > 2 years at 4°C. Bottle 5: D-Lactate dehydrogenase suspension （1.1 mL, 20,000 U/mL）. Stable for > 2 years at 4°C. Bottle 6: D-/L-Lactic acid standard solution （5 mL, 0.15 mg/mL of each） in 0.02 % （w/v） sodium azide. Stable for > 2 years at 4°C.历史资料:2009-12-22版本 2009-12-29版本 2009-12-30版本 2010-04-15版本 2010-05-28版本 | id） Assay Kit 规格：100次（各50次） 爱尔兰JKY/K-DLATE |
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