实验通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。

5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。

仪器：

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

5、微量移液器

样本收集与前处理：

血清（浆）可直接测定。

红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。

动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。

培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。

具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样，不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温

1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

L-赖氨盐盐 Ultra pure,≥99.5% (AT)酯酶Cβ2抗体ATG4C  自噬相关蛋白4C抗体

非动物源，EP, JP, USP ；用于培养，98.5 to 101.0%硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ/巯抗氧化蛋白抗体ATG4A  自噬相关蛋白4A抗体

L-硫氨 99%脂酰肌激酶（PI3Kβ）抗体ATG3  自噬相关蛋白3抗体

L-硫氨 非动物源，EP, JP, USP, 用于培养, 99.0-101.0%脂酶2结构域3抗体ATG18/WIPI1  自噬相关蛋白18抗体

L-脯氨 99%胞质分裂调控蛋白1抗体ATG16L2  自噬体ATG16L2蛋白抗体

L-色氨 99%化蛋白酶2A（PP2Aα）抗体ATG16A/ATG16L1  自噬相关蛋白16A抗体

L-酪氨 99%石骨症相关蛋白PLEKHM1抗体ATG13  自噬相关蛋白13抗体

L-苏氨 99%血小板白C激酶底物同源结构域M2抗体ATG1/ULK1  自噬相关蛋白1抗体

非动物源，EP, JP, USP ；用于培养，99.0-101.0%血小板白C激酶底物同源结构域M3抗体ATF6  活化转录因子6抗体

非动物源，EP, JP, USP ；用于培养，99.0 - 101.0 %多腺苷二多聚酶抗体(N端)ATF4/CREB-2  活化转录因子4抗体

L-色氨 非动物源，EP, JP, USP ；用于培养，99.0-101.0%酪氨酶PTPδ抗体 蛋白酪氨酶D受体抗体ATF3  活化转录因子3抗体

L-缬氨 99%钙粘蛋白相关神经受体8抗体ATF2  活化复制因子2抗体

三钙 98%，β-phase basis原钙粘附蛋白18抗体ATF1  活化转录因子1抗体

癸二 99%原钙粘附蛋白20抗体ATEXPA10  植物延长蛋白（拟南芥）

癸二 色谱固定液，155℃原钙粘附蛋白8抗体ATE1  精氨tRNA的蛋白转移酶1抗体
玉米素核苷（ZR）含量试剂盒说明书

热休克蛋白90α抗体Shrimp tropomyosin /FITC  荧光素标记南美白对虾过敏原蛋白（虾原肌球蛋白）抗体IgG

热休克蛋白90β/HSP90 β 抗体SIP1 /FITC  荧光素标记运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体IgG