产品名称：蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)说明书

规格：48样、96样、

货号：GOY-016449

检测方法：可见分光光度法、微板法

产品分类：氮代谢系列

公司产品仅用于科研贮存温度：2～8℃。

本试剂盒保质期：6个月

【实验前溶液配制】

配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复

溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。

配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19

稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量

配制洗涤液。

配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份

浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。

【所用仪器、试剂】

仪        器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装

置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

试            剂:乙腈、中性氧化铝

测定步骤：

1、 酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释50倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水1：49稀释。

3、 工作液配制：在试剂一加入100μl试剂二，充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml：0.1ml的比例混匀配制）

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。

5、 样本测定（在96孔板中依次加入下列试剂）

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

KLH  血蓝抗体核黄激(RFK)ELISA试剂盒

KLH  血蓝抗体和肽(copeptin)ELISA试剂盒

KLK1  激肽释放1抗体含免疫球样环和上皮生长因子样域酪氨激2(Tie-2)ELISA试剂盒

kappa Opioid receptor  kappa型阿片受体抗体含免疫球样环和上皮生长因子样域酪氨激1(Tie-1)ELISA试剂盒

mu Opioid receptor  µ-型阿片受体抗体含SET域4(setd4)ELISA试剂盒

Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  化µ-型阿片受体抗体含patatin样脂域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)ELISA试剂盒

Delta Opioid Receptor  D型阿片受体抗体过氧化脂质/乳过氧化物(LPO)ELISA试剂盒

Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)  化D型阿片受体抗体过氧化脂质(LPO)ELISA试剂盒

KLK3  激肽释放3/舒血管3抗体过氧化物体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒

KLK4  激肽释放4抗体过氧化物体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒

KLK7  激肽释放7抗体过氧化物体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒

KLK9  激肽释放9抗体过氧化氢(CAT)ELISA试剂盒

KLK10  激肽释放10抗体过敏/补体片断4(C4a)ELISA试剂盒

KLK14  激肽释放14抗体果糖二缩A(ALDOA)ELISA试剂盒

KMT6/EZH2  抑癌EZH2抗体果糖(FRA)ELISA试剂盒冰冻切片组织IGF 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人脐动脉平滑肌微小RNAD-2-氨丁

石蜡切片组织IGF 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次晚期糖化终末产物(AGE)天然BOC-L-异亮氨

载玻片细胞IGF 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次白(ALB)天然BOC-D-色氨

冰冻切片组织IGF 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次脑型肌激(CKB)天然FMOC-D-色氨

石蜡切片组织IGF 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次糖化血红A1c(HbA1c)天然 弹性（猪胰）

细胞IGF 表达比色法定量检测试剂盒10/50 次血红(HB)天然 DEAE琼脂糖凝胶FF

细胞IGF 表达荧光定量检测试剂盒10/50 次免疫球G1(IgG1)天然 葡聚糖T200

IGF 表达西方杂交分析试剂盒5次免疫球G(IgG)天然 十七

IGF 免疫共沉淀分析试剂盒5次免疫球G1(IgG1)天然 人褪黑色（MS）ELISA试剂盒,MS ELISA

IGF 表达elisa试剂盒25次ISL LIM同源框1(ISL1)天然 人雌三（E3）ELISA试剂盒,E3 ELISA

细胞ANDROGEN RECEPTOR 表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次ISL LIM同源框1(ISL1)天然 人喋呤（MTX）ELISA试剂盒,

载玻片细胞ANDROGEN RECEPTOR 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次碳酐Ⅱ(CA2)天然 人S100（S-100）ELISA试剂盒,

冰冻切片组织ANDROGEN RECEPTOR 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次碳酐Ⅱ(CA2)天然 小鼠白介9（IL-9）ELISA试剂盒,

石蜡切片组织ANDROGEN RECEPTOR 表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次癌胚抗原相关粘附分子1(CEACAM1)天然 小鼠肾损伤分子1（Kim-1）ELISA试剂盒,

载玻片细胞ANDROGEN RECEPTOR 表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次肌肌激(CKM)天然 小鼠色C（Cyt-C）ELISA试剂盒,
蛋白含量(SP)试剂盒(双缩脲法)说明书可溶性生激表达基因2检测试剂盒alpha 1肾上腺能受体B抗体

可溶性Toll样受体6检测试剂盒Bcl2 alpha抗体

可溶性T免疫球粘分子3检测试剂盒白抗原B相关转录5抗体

可溶性白介2受体检测试剂盒BTB/POZ结构域1（型肝炎病的NS5A反转录8）抗体

可溶性白介6受体检测试剂盒BCL7B抗体

可溶性白介7受体检测试剂盒性核2(锌指basonuclin2)抗体

可溶性白分化抗原14检测试剂盒B白血病/淋巴瘤7抗体

可溶性白介6检测试剂盒先天性脂肪代谢障碍2抗体（常染色体显性遗传痉挛性截瘫17）

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。