荧光定量PCR试剂盒技术：
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
苏拉明钠MSK1 (C27B2) Rabbit mAb四丁基溴化

弹性蛋白酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb苄基-1-哌碳酸酯

脂肪酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb5-氯吡啶-2-

木聚糖酶Phospho-CrkII (Tyr221) Antibody5-溴-2-吡啶甲

透明质酸,玻尿酸(分子量80万-150万)PD-1 (D7D5W) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氟吡啶-2-

透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量3K）CrkII Antibody氨基-5-甲基吡唑

透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量10K）RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb(2-氯甲基)三基溴化膦

透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量90K）RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb苄基哌啶

透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量4K）EA/UBXD8 (D8H6D) Rabbit mAb2-三氟甲酰氯

罗哌卡因Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb活性二氧化锰

罗哌卡因(标准品)Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb环氧溴烷

醋酸棉酚Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,二溴噻吩

过氧化氢酶(牛肝脏)Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb3,二溴噻吩

他唑巴坦,他唑巴坦酸Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb2,5-二溴噻吩

他唑巴坦(标准品)PHF2 (D45A2) Rabbit mAb2-甲基-2-戊酸

NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水合物PHF2 (D45A2) Rabbit mAb甲基-羟甲基氧杂环丁烷

NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水合物Bcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)D(+)-10-樟脑磺酸

β-NADP;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸酸;氧化型辅酶 IIBcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)溴嘧啶
布鲁塞尔德克酵母探针法荧光PCR检测试剂盒胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒S100A1  S100A1抗体100 ul

胱硫-γ-裂解酶(CSE)ELISA试剂盒S100A13  S100A13抗体20 ul

胱硫β-合酶(CBS)ELISA试剂盒SAMDC  S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抗体1 Kit

瓜氨酸ELISA试剂盒S100-A8/MRP8  S100A8抗体100 ul

固调节元件结合蛋白1C(SREBP-1C)ELISA试剂盒S100-A9/MRP14/CFAG  S100A9抗体100 ul

固调节元件结合蛋白1A(SREBP-1A)ELISA试剂盒Shrimp tropomyosin  南美白对虾过敏原蛋白（虾原肌球蛋白）抗体100 ul

骨织素(Ostn)ELISA试剂盒SAP-1/Synaptophysin  突触相关蛋白-1/突触素抗体100 ul

骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒SARS putative orflab polyproin   抗体100 ul

骨形态形成蛋白拮抗蛋白ELISA试剂盒SARS S-proin  兔抗表面S蛋白抗体100 ul