客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR试剂盒技术：
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
N-(甲氧基亚甲基)-丁基(>98.0%(GC)(T))四氢吡喃-酸

N-(甲氧基亚甲基)-酰氧基(>99.0%(T))五氟吡啶

N-(甲氧基亚甲基)(>98.0%(GC)(T))焦酸四苄酯

[(甲氧基亚甲基)氨基]肉桂酸(>98.0%(T))溴-1H-吲唑

[(甲氧基亚甲基)氨基](>98.0%(T))2-氨基-6-溴酚

N-(甲氧亚甲基)-羟基(>98.0%(T))2,5-二溴对二甲酸二酯

3,3'-二-N,N'-双(甲氧基亚甲基)联(>98.0%(T))2-氨基-4,5-二氟甲酸甲酯

4,4'-偶氮二甲(>98.0%(GC))溴-2-

4,4'-氧化偶氮(>98.0%(N))8-羟基-1,2,3,四氢喹啉

氧化偶氮-4,4'-二羧酸二酯(>97.0%(GC))8-羟基-1,2,3,四氢异喹啉

4,4'-双(己氧基)氧化偶氮(>96.0%(N))8-羟基异喹啉

4,4'-二戊氧基氧化偶氮(>95.0%(N))8-三氟甲基喹啉

4,4'-二丁氧基氧化偶氮8-溴-1,2,3,四氢异喹啉

4,4'-二正辛氧基氧化偶氮(>95.0%(N))8-溴-1,2,3,四氢异喹啉盐酸盐

4,4'-二壬氧基氧化偶氮8-溴-5-硝基喹啉

(反-戊基环己基)甲(>98.0%(GC))8-溴-6-甲基喹啉

4'-(反-戊基环己基)二基-甲(>98.0%(GC))8-溴-6-喹啉

基-4'-戊基联(>98.0%(GC))保护的甲基-L-丝氨酸二环己基铵盐
锦鲤疱疹病毒探针法荧光PCR检测试剂盒1号染色体开放阅读框51抗体lamin C/FITC  荧光素标记核纤层蛋白C抗体IgG100 ul

1号染色体开放阅读框52抗体Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC  荧光素标记酸化核纤层蛋白A/C抗体IgG100 ul

1号染色体开放阅读框67抗体LAIR-1/CD305/FITC  荧光素标记白细胞相关免疫球蛋白样受体1抗体IgG500 ul

1号染色体开放阅读框83抗体LAIR-2/CD306/FITC  荧光素标记白细胞相关免疫球蛋白样受体2抗体IgG1 Kit

富含半胱氨酸分泌蛋白3抗体Langerin/CD207/FITC  荧光素标记白细胞分化抗原CD207抗体IgG500 ul

肿瘤/抗原26抗体LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC  荧光素标记层粘蛋白α3抗体IgG100 ul

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2C抗体LAP18/stathmin/FITC  荧光素标记白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体IgG100 ul

Cullin2抗体Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC   荧光素标记酸化原癌基因蛋白18抗体IgG500 ul

钙调蛋白激酶CaMK1D抗体Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC   荧光素标记酸化原癌基因蛋白18抗体IgG500 ul
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。