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螺杆菌通用PCR检测试剂盒说明书

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产品型号50T

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更新时间:2020-11-10 10:56:28浏览次数:682次

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螺杆菌通用PCR检测试剂盒说明书原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称:螺杆菌通用PCR检测试剂盒说明书
英文名称:Helicobacter spp.PCR
编号:HE31065-R
类别:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。

储需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
保存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
氨基甲酸甲酯/氨基甲酸甲脂/甲基乌来坦/尿基烷/胺甲酸甲酯/甲乌来坦/氨基脲烷/Urethylane 包装;1g

迭氮*基硅烷/*基甲硅烷基叠氮的化合物/叠氮*基硅烷/*基叠氮化硅/叠氮化*基硅烷/叠氮基*基硅烷/Azidotrimethylsilane 包装;1g

对羟基苯/4’-羟基苯/对丙酰基苯酚/对甲氧苯乙酮/4′-Hydroxypropiophenone 包装;5g

对苯二甲酰氯/1,4-苯二碳酰二氯/对酞酰氯/对苯二酰二氯/对苯二酰氯/氯化对苯二甲酰/对苯二甲酰二氯/对酞酰二氯/TCI/TPC 包装;1g

4-氟-3-氯/氟氯/3-氯-4-氟/3-氨基-6-氟氯苯/3-Chloro-4-fluoroaniline 包装;5g

乙酸甲脒/甲脒醋酸/甲脒乙酸酯/醋酸甲脒/甲脒乙酸盐/醋酸甲醚/乙酸甲醚/Formamidinium acetate 包装;1g

异香兰酸/3-羟基-4-甲氧基苯甲酸/异香草酸/原儿茶酸-4-甲基醚/原儿茶酸-4-甲醚/Isovanillic acid 包装;1g

焦磷酸四苄酯/焦磷酸四苄基酯/Tetrabenzyl pyrophosphate 包装;250mg

3-吲哚甲醛/吲哚-3-甲醛/3-醛基吲哚/1H-吲哚-3-甲醛/3-甲醛吲哚/Indole-3-carboxaldehyde 包装;5g

甲基异丙/3-甲基-2-丁酮/3-甲基丁酮/1,1-二甲基/甲基异丙基酮/异丙基甲/3-甲-2-丁酮/MIPK 包装;100mg

十九酸甲酯/正十九酸甲酯/十九烷酸甲酯/十九碳酸甲酯/十九烷基甲酯/Methyl nonadecanoate 包装;25mg

4-甲基-3-戊烯-2-酮/甲基异甲酮/甲基戊烯酮/米基化氧/亚异丙基/异丙叉/异基/异丙亚基/Mesityl oxide 包装;25g

嘧啶/间(二)氮苯/间二嗪/2-氨基-4-甲氧基嘧啶/2-甲硫基嘧啶/嘧啶碱/Pyrimidine 包装;5g

3-氨基-1,2-丙二酮/3-氨基-1,2-/1-氨基-2,3-/3-氨基甘油/2,3-二羟基胺氨/2,3-二羟基丙胺/3-氨基-1,2-丙烷二醇/氨基/3-Ami,2-propanediol 包装;100g

邻羟基苄醇/2-羟基苯甲醇/杨醇/邻羟基苯甲醇/2-羟基苄醇/Salicyl alcohol 包装;25g

1-苯基-1,2-丙二酮/甲基苯基乙二酮/1-苯-1,2-丙二酮/乙酸苯甲酸/Acetyl benzoyl 包装;10g

氧化氘/重/Deuterium oxide 包装;50g
螺杆菌通用PCR检测试剂盒说明书Bacillus│timonensis 中文名称:芽胞杆菌(加词待译)种属:Bacillus│timonensis分离基物:样/养猪场沼气池沼液提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:潜在的生物转化微生物/未经过单菌验证的反硝化菌培养方法培养基:33生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Bacillus│cohnii 中文名称:科氏芽胞杆菌种属:Bacillus│cohnii分离基物:沉积物/TVG表层沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:潜在的有机污染物降解菌/分离自十溴联苯醚富集菌群培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Erythrobacter│vulgaris 中文名称:普通赤杆菌种属:Erythrobacter│vulgaris分离基物:沉积物/硫化物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Brachybacterium│sacelli 中文名称:教堂小短杆菌种属:Brachybacterium│sacelli分离基物:沉积物/箱式样品提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Lentibacillus│sp. 中文名称:慢生芽孢杆菌种属:Lentibacillus│sp.分离基物:沉积物/重力活塞取样提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:潜在的新种培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Aquimarina│spongiae 中文名称:海绵海杆菌种属:Aquimarina│spongiae分离基物:生物样/海绵提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99%

Aquimarina│gracilis 中文名称:海杆菌(加词待译)种属:Aquimarina│gracilis分离基物:生物样/贻贝肠道内容物提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99%

Pseudochrobactrum│kiredjianiae 中文名称:克氏假苍白杆菌种属:Pseudochrobactrum│kiredjianiae分离基物:沉积物/表层沉积物提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:潜在的无机污染物抗性菌/分离自Cr富集菌群培养方法培养基:1001生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97%,含0.1 % 对苯二酚 稳定剂
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。

 

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