实验通用规则：

1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。

4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。

5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。

仪器：

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

5、微量移液器

样本收集与前处理：

血清（浆）可直接测定。

红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。

动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。

培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。

具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样，不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温

1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

黄芪皂苷 II  分析标准品，≥98%人SPARC相关模块化钙结合蛋白2(SMOC2)免疫试剂盒质分裂付出蛋白1抗体p70 S6 kinase beta  核糖体蛋白S6激酶1抗体

黄芪总皂苷 分析标准品，≥98%人SPARC相关模块化钙结合蛋白1(SMOC1)免疫试剂盒脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体p70 S6 kinase alpha  化核糖体p70 S6蛋白激酶抗体

黄芪皂苷I 分析标准品，≥98%人SMAD3 免疫试剂盒DUX3蛋白抗体P63 protein/P51A  P63 肿瘤抑制因抗体

盐黄连碱 分析标准品，≥98%人SMAD2 免疫试剂盒死亡相关蛋白1抗体p58ipk  p58ipk抗体

野百合碱 分析标准品人SHC转化蛋白1(SHC1)免疫试剂盒轴丝动力蛋白重链9抗体p55/DCAF1  染色质组装因子1P55抗体

野百合碱 95%人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)免疫试剂盒化动力相关蛋白1抗体p53R2/RRM2B  核苷还原酶M2B抗体

千金藤素 分析标准品,≥98%(HPLC)人Seryl- tRNA合成酶，质(SARS/SERS)免疫试剂盒DNA连接酶4抗体p53BP1/53BP1  p53结合蛋白1抗体

白屈菜红碱 分析标准品，>98% 人Salusin Beta(Salusin β)免疫试剂盒二肽肽酶6抗体p53AIP1  p53调节凋亡诱导蛋白1抗体

班蝥素 分析标准品，≥98%人Salusin Alpha(Salusin α)免疫试剂盒二氢叶还原酶抗体P53(wt-p53) (D2F7)  肿瘤抑制因野生型P53单抗

莪术 分析标准品，≥98%人SAA/LDL复合物 免疫试剂盒有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体P53(wt-p53)  肿瘤抑制因抗体（野生型P53）

五加皂苷B 分析标准品，≥98%人S100钙结合蛋白P(S100P)免疫试剂盒有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体P53 protein(wt-p53)  肿瘤抑制因P53蛋白抗体（野生型P53）

告达亭甙元 分析标准品，≥98%人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)免疫试剂盒DOM3Z蛋白抗体p53 DINP1  p53诱导核蛋白1抗体

断血流皂苷A 分析标准品，≥98%人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)免疫试剂盒蓬乱蛋白2抗体p53 (FL-393)  肿瘤抑制因p53抗体

鼠尾草  分析标准品，≥92%人S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)免疫试剂盒化蓬乱蛋白2抗体p53 (DO-1)  肿瘤抑制因p53抗体

黄杨碱 分析标准品，≥99%人S100钙结合蛋白A6/钙粒蛋白A(S100A6)免疫试剂盒转录下调蛋白1抗体P4HB  蛋白二硫键异构酶P4HB抗体
植酸酶氧气调节蛋白150抗体酯封端左旋聚(重均分子量206-288万) Hydrazine sulfate

氧化应激反应蛋白1抗体酯封端左旋聚(重均分子量26-36万) Cyclandelate

固生蛋白M抗体酯封端左旋聚(重均分子量3-5.5万) Nitrilotriacetic acid

末端多聚腺苷1蛋白抗体酯封端左旋聚(重均分子量36-48万) 1,3- Propylene Glycol

嗅球蛋白3抗体酯封端左旋聚(重均分子量48-73万) Diethylene Glycol

转录因子OTX1抗体酯封端左旋聚(重均分子量5.5-9 万) Chlorothiazide

转录因子OTX2抗体酯封端左旋聚(重均分子量73-102万) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide

转录因子OTX1+OTX2抗体酯封端左旋聚(重均分子量9-17万) Alkene

增食欲素B/欲激素B(3R,4R)-N,4-二-1-()-3-... N-Methylparoxetine

脊髓性肌症蛋白Gemin7抗体MRP3/FITC  荧光素标记多药耐药相关蛋白3抗体IgG

GTP结合丝裂原诱导T蛋白抗体MRP4/ABCC4 /FITC  荧光素标记多药耐药相关蛋白4抗体IgG