产品名称：乙酸激酶(ACK)活性试剂盒说明书

规格：48样、96样、

货号：GOY-016617

检测方法：紫外分光光度法、微板法

产品分类：呼吸代谢途径系列

公司产品仅用于科研贮存温度：2～8℃。

本试剂盒保质期：6个月

【实验前溶液配制】

配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复

溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。

配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19

稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量

配制洗涤液。

配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份

浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。

【所用仪器、试剂】

仪        器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装

置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

试            剂:乙腈、中性氧化铝

测定步骤：

1、 酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释50倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水1：49稀释。

3、 工作液配制：在试剂一加入100μl试剂二，充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml：0.1ml的比例混匀配制）

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。

5、 样本测定（在96孔板中依次加入下列试剂）

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

鸭疫里氏杆菌10倍酵母菌SD-URA培养基（半乳糖）猪促生长激释放激(GHRH)试剂盒

橙色杆状菌酵母菌SD-URA培养基（半乳糖+棉籽糖）猪促卵泡(FSH)试剂盒

褐球固氮菌*10倍酵母菌SD-URA培养基（半乳糖+棉籽糖）猪Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒

埃切毕赤酵母酵母菌SD-LEU/TRP/HIS培养基猪表皮生长因子(EGF)试剂盒

球孢白僵菌酵母菌SD-TRP/URA培养基猪白介8(IL-8/CXCL8)试剂盒

多分枝灵芝10倍酵母菌SD-TRP/URA培养基猪白介6(IL-6)试剂盒

植物乳杆菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培养基猪白介4(IL-4)试剂盒

美澳型核果褐腐病菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培养基猪白介3(IL-3)试剂盒

犁黑轮斑交链孢霉酵母菌SD-ADE培养基猪白介2(IL-2)试剂盒

季也蒙迈耶氏酵母酵母菌SD-ADE培养基猪白介1β (IL-1β)试剂盒

空肠弯曲杆菌酵母菌SD-TRP/HIS培养基猪白介18(IL-18)试剂盒

宇佐美曲霉酵母菌SD-TRP/HIS培养基猪白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒

贝氏葡萄座腔菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE/LEU培养基猪白介10(IL-10)试剂盒

类产碱假单胞菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE/LEU培养基猪白介1(IL-1)试剂盒

酿酒酵母酵母菌*补充混合（CSM）培养基猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)试剂盒

居海绵溶杆菌酵母菌*补充混合（CSM－HOLLENBERG）培养基猪Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)试剂盒

毛柄金钱菌(金针菇)酵母菌*补充混合（CSM－BRENT）培养基猪间粘附分子2(ICAM-2/CD102)试剂盒

黄色孢链霉菌酵母菌*补充混合（CSM－HOPKINS）培养基猪间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒

总状共头霉酵母菌CSM-△LEU/△TRP培养基猪纤溶原激活物抑制因子1(PAI-1)试剂盒

环圈链霉菌真菌格莫瑞六亚甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；GMS）银染试剂盒猪纤溶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒
乙酸激酶(ACK)活性试剂盒说明书色氨-5-羟化检测试剂盒单丝氨激1抗体

N-乙-5-羟色甲基转移检测试剂盒低分子量体7抗体

盐还原检测试剂盒促黄体生成抗体

蔗糖合成检测试剂盒层粘α1抗体

番茄黑环病检测试剂盒LETM1抗体

可溶性检测试剂盒乳脱氢抗体

山梨脱氢检测试剂盒化丝氨/苏氨激抗体

麦胚凝集检测试剂盒层粘连β1抗体

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。