产品名称:超氧阴离子(O₂-)试剂盒价格
规格:48样、96样、
货号:GOY-016330
检测方法:可见分光光度法、微板法
产品分类:氧化应激系列
公司产品仅用于科研贮存温度:2~8℃。
本试剂盒保质期:6个月
【实验前溶液配制】
配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复
溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。
配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19
稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量
配制洗涤液。
配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份
浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。
【所用仪器、试剂】
仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装
置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )
微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl
试 剂:乙腈、中性氧化铝
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
酿酒酵母细胞GSK-3BETA表达比色法定量检测试剂盒大鼠抗甲状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)试剂盒
橄榄绿链霉菌细胞GSK-3BETA表达荧光定量检测试剂盒犬双氢睾(DHT)试剂盒
白僵菌GSK-3BETA表达西方杂交分析试剂盒人双氢睾(DHT)试剂盒
冬菇属GSK-3BETA免疫共沉淀分析试剂盒小鼠双氢睾(DHT)试剂盒
米曲霉GSK-3BETA表达ELISA定量检测试剂盒大鼠双氢睾(DHT)试剂盒
耐冷冷杆菌细胞PI-3 KINASE P110BETA表达流式细胞仪检测试剂盒人维生D受体(VD R)试剂盒
普通链霉菌载玻片细胞PI-3 KINASE P110BETA表达荧光显微镜检测试剂盒人抗巨病抗体IgM(anti-CMV IgM)试剂盒
香菇冰冻切片组织PI-3 KINASE P110BETA表达荧光显微镜检测试剂盒人抗狂犬病抗体(anti-RV)试剂盒
Paucimonas lemoignei石蜡切片组织PI-3 KINASE P110BETA表达荧光显微镜检测试剂盒人心肌肌钙Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒
芽孢杆菌属载玻片细胞PI-3 KINASE P110BETA表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒小鼠心肌肌钙Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒
豇豆慢生根瘤菌冰冻切片组织PI-3 KINASE P110BETA表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒大鼠心肌肌钙Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒
嗜热链球菌石蜡切片组织PI-3 KINASE P110BETA表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒人肌激同工MB(CK-MB)试剂盒
新疆盐地杆菌属细胞PI-3 KINASE P110BETA表达比色法定量检测试剂盒犬肌红(MYO/MB)试剂盒
桃色枝顶孢细胞PI-3 KINASE P110BETA表达荧光定量检测试剂盒人肌红(MYO/MB)试剂盒
肠杆菌属PI-3 KINASE P110BETA表达西方杂交分析试剂盒小鼠肌红(MYO/MB)试剂盒
游动球菌属PI-3 KINASE P110BETA免疫共沉淀分析试剂盒大鼠肌红(MYO/MB)试剂盒
胶孢PI-3 KINASE P110BETA表达ELISA定量检测试剂盒人迟现抗原(VLA)试剂盒
Herbaspirillum canariense细胞PP2A表达流式细胞仪检测试剂盒犬内皮1(ET-1)试剂盒
柠檬假丝酵母载玻片细胞PP2A表达荧光显微镜检测试剂盒豚鼠内皮1(ET-1)试剂盒
*杏叶斑链格孢冰冻切片组织PP2A表达荧光显微镜检测试剂盒人内皮1(ET-1)试剂盒
超氧阴离子(O₂-)试剂盒价格畸胎瘤源性生长因子检测试剂盒γ-微管GCP6抗体
封闭5检测试剂盒β-葡萄糖1抗体
超敏心肌肌钙Ⅰ检测试剂盒甘氨裂解系统H抗体
谷氨合成检测试剂盒15号染色体开放阅读框58抗体
幽门螺杆菌尿抗体检测试剂盒淀粉结合域1抗体
幽门螺杆菌相关基因A抗体检测试剂盒延伸因子G1抗体
心营养-1检测试剂盒β葡萄糖2抗体
组织G抗体检测试剂盒β葡萄糖3抗体
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。