转基因测试纸

转基因测试纸产品介绍：
转基因测试纸浙江托普云农科技专业生产，用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗，双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。

【转基因 Cry2A 试剂盒试剂准备】
试剂盒中的 20×浓缩洗涤液 30 ml 加 570 ml 灭菌 ddH2O 溶解稀释至 1×洗涤液，
5×抽提液（30 ml）加 120 ml ddH2O 稀释至 1×抽提液，4 ℃存放备用。

【转基因 Cry2A 试剂盒样品准备】
称取约 20 mg 叶片，加 0.5 ml 1×抽提液（使用前 30 min 放置室温）研磨至匀浆，室温放置 30 min，测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。
测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时，样品称取约 40 mg，加 1ml 1×抽提液研磨。

【ELISA 反应】
1. 依次加 100 μl 阴性对照，标准品（3 个不同浓度的标样： 1 ppb， 5 ppb，10ppb）和待测样品至 96 孔板；
2. 用封口膜盖住 96 孔板，快速摇动平板混匀样品；
3. 37 ℃恒温箱孵育 30 min；
4. 倒掉 96 孔板中液体，用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板，漂洗 5 次，用吸水纸拍干；
5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry2A-酶标抗体，然后重复步骤 2；
6. 37 ℃恒温箱孵育 30 min；
7. 倒掉 96 孔板中液体，用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板，漂洗 5 次，用吸水纸拍干；
8. 依次加入 50 μl 底物 A 液，50 μl 底物 B 液，重复步骤 2；
9. 37℃恒温箱孵育 10 min，加 50μl 终止液，充分混匀终止反应，15 min 以内在酶标仪上读取结果。在 450 nm 为主波长，630 nm 为次波长（或单波长 450 nm）下，用空白孔校零，再读取各孔 OD 值。

【转基因 Cry2A 试剂盒技术参数】

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