小鼠透明质酸ELISA 检测试剂盒实验方案

小鼠透明质酸ELISA 检测试剂盒实验方案

试剂的准备
标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
80 nmol/L （6号标准品） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
40 nmol/L （5号标准品） 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
20 nmol/L （4号标准品） 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
10 nmol/L （3号标准品） 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
5.0 nmol/L （2号标准品） 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
2.5 nmol/L （1号标准品） 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 nmol/L （空白对照） 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍

稀释。

操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案
标准品浓度（nmol/L）
A 80 80 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
B 40 40 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
C 20 20 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
D 10 10 样品 样品 样品 样品 样品 样品小鼠透明质酸ELISA 检测试剂盒 样品 样品 样品 样品
E 5.0 5.0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
F 2.5 2.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

大鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒
大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒
大鼠血红素氧合酶1（HO-1）ELISA试剂盒
大鼠磷脂酶A2（PL-A2）ELISA试剂盒
大鼠组织因子途径抑制物（TFPI）ELISA试剂盒
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大鼠水通道蛋白4（AQP-4）ELISA试剂盒
大鼠水通道蛋白3（AQP-3）ELISA试剂盒
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大鼠水通道蛋白2（AQP-2） ELISA试剂盒
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小鼠透明质酸ELISA 检测试剂盒大鼠抑制素A（INH-A）ELISA试剂盒
大鼠绒毛膜促性腺激素β（β-CG）ELISA试剂盒