低聚木糖的测定方法

1.低聚木糖的测定(液相色谱法)

    本方法适用于添加低聚糖的食品中低聚塘的检测.ELISA试剂盒

1. 1方法提要

    低聚糖各组分用液相色谱法分离井定量测定。以乙睛、水作流动相在碳水化合物分析柱上糖的分离顺序是先单糖后双糖，先低聚后多聚，以示差折射检测器检测。由T于本产品为>95%的低聚木塘纯品，故可用面积比值法求出样品中低聚搪含量。

1. 2仪器

(1)液相色谱仪:Waters HPLC 515泵，410示差折光射检测器，色谱工作作站。

(2)超声波振荡器。

(3)微孔过湾器(滤膜0. 45um)

1. 3试剂

(1)乙腑(色谱纯)

(2)水(三蒸水并经Milli-Q超纯处理)

(3)  D一木搪(D-xylose)C5H1005上海市化学试剂公司分装(E. Merck分装):定位用.。因Sigma公司无低聚木糖的样品。ELISA试剂盒

1. 4测定步骤

(1)样品处理

    用精度0. 0001g的分析大平准确称取胶囊内容物约1.0g，于100ml的容器中.加水约80m1于超声波振荡器中振荡提取15分钟，加水至刻度，摇匀，用0.45um滤膜过滤后直接进样测定。

(2)色谱分离条件:

色谱柱:SUGAR PAK I 6.5MMX300MM COL，SUGAR-PAK INSERTS 10/PK，GUARD-PAK HOLDER

流动相:乙腈+水(85+15)

流速:0.8m1/min

检侧器灵敏度:4

进样zui:20uL

(3)样品测定:

    取样品处理液20uL注入液相色谱仪进行分离。1%纯木糖溶液作定位用。根据低聚糖的分离原理，木糖色谱峰后的所有峰为低聚木糖的总和。以其峰面积计算出样液中低聚木糖的含量。

(4)低聚木糖的分离顺序为:

    阿拉伯糖(Al)葡萄搪(G1)、木糖(X)、木二糖(X1)、木二糖(X2)、木四塘(X3)、木五糖

  (X4)、木六糖(X5)、木七糖(X6).ELISA试剂盒