生物显微镜

生物显微镜的分类

1. 按照定位级别分类。可以分为学生级、实验级、研究级生物显微镜。

2. 按照目镜的个数分类。可以分为单目型、双目型、三目型生物显微镜。

按照目镜个数分类

3. 按目镜和移动台的相对位置分类。可以分为正置生物显微镜和倒置生物显微镜。正置(常规)生物显微镜的物镜在移动台的上方，倒置生物显微镜的物镜在移动台的下方。

按照目镜和移动台相对位置分类

4. 按成像原理分类。可以分为光学生物显微镜和电子生物显微镜。

光学显微镜主要由目镜、物镜、载物台和反光镜(集光镜)组成。目镜和物镜都是凸透镜，焦距不同。物镜的凸透镜焦距小于目镜的凸透镜的焦距。物镜相当于投影仪的镜头，物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜，该实像又通过目镜成正立、放大的虚像。经显微镜到人眼的物体都成倒立放大的虚像。

显微镜的成像原理

电子显微镜是根据电子光学原理，用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜，使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像。由于电子束的波长远远小于可见光的波长，所以即使电子束的锥角仅为光学显微镜的1%，电子显微镜的分辨本领仍远远优于光学显微镜。光学显微镜的大放大倍率约为2000倍，而现代电子显微镜大放大倍率已经超过了300万倍 ^[1] 。

电子显微镜

生物显微镜的基本结构

生物纤维镜的结构

1. 镜座。位于显微镜底部，用于支持全镜。

2. 镜臂。位于镜筒后面，通常为弓形，用于支持镜筒和搬移显微镜时握持部位。

3. 镜筒。位于显微镜上方，上接目镜，下接物镜转换器。

4. 物镜转换器。位于镜筒下方的转盘，通常有3~4个圆孔，可装配不同放大率的物镜，可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。

5. 移动台。又名载物台、工作台或镜台，用于放置标本。移动台上有两个金属压片夹叫标本夹，用于固定玻片标本。有的载物台上装有推片器用来移动标本，有的载物台本身可以移动。

6. 调焦装置。为了得到清晰的图像，必须调节物镜与标本之间的距离，使物镜的焦点对准标本，这一操作叫调焦。调焦通过粗准焦旋钮和细准焦旋钮来实现。

7. 物镜。安装在镜筒下端的物镜转换器下方，因为它靠近被视物体，故又称接物镜。物镜是决定显微镜性能如分辨力的重要的构件。物镜的作用是将标本the first次放大成倒像。一台显微镜备有数个物镜，每个物镜由数片不同球面半径的透镜组成。物镜下端的透镜口径越小，镜筒越长，其放大倍数越高；否则反之。物镜有低倍物镜和高倍物镜，其放大倍数一般刻在物镜的镜筒上，例如4×、8×、10×、……、100×，分别表示4倍、8倍、10倍……、100倍。其中40-65倍叫高倍物镜，90或100倍的称为油浸物镜。

8. 目镜。安装在镜筒上端，因为它靠近观察者的眼睛，又称接目镜。目镜的作用是将由物镜放大的实像进一步放大成一个起立的虚像，其作用相当于一个放大镜。但它并不增加显微镜的分辨力。目镜的视野内有一条黑线，叫做“指针”，可以指示所观察的部位。根据需要，目镜内也可安装测微尺，用以测量所观察物体的大小。一般显微镜备有几个放大倍数不同的目镜，其放大倍数刻在目镜边框上，如5×、10×、15×等（显微镜的总放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数）。

9. 聚光镜。安装在移动台下方支架上，主要由聚光镜和孔径光阑组成。聚光镜作用是会聚集光镜的光线，增加标本的照明。孔径光阑又称光圈用来调节光线的强弱。在孔径光阑下面，通常还有一个圆形的滤光片架，可根据镜检需要放置滤光片。

10. 光源。通常安装在显微镜的镜座内提供光源。

生物显微镜的使用方法

1. 取用和放置。从镜箱中取出显微镜时，必须一手握持镜臂，一手托住镜座，保持镜身直立，切不可用一只手倾斜提携，防止摔落目镜。要轻取轻放，放时使镜臂朝向自己，距桌子边沿5-10厘米处。要求桌子平衡，桌面清洁，避免直射阳光。

2. 开启光源。打开电源开关。

3. 放置玻片标本。将待镜检的玻片标本放置在移动台上，使其中材料正对聚光镜*。然后用弹簧压片夹在玻片的两端，防止玻片标本移动。再通过调节玻片移动器或调节移动台，将材料移至正对聚光镜*的位置。

4. 低倍物镜观察。用显微镜观察标本时，应先用低倍物镜找到物像。因为低倍物镜观察范围大，容易找到物像并定位到需作精细观察的部位。方法为：

1) 转动粗准焦旋钮，用眼从侧面观望，使镜筒下降，直到低倍物镜距标本0.5厘米左右。

2) 从目镜中观察，用手慢慢转动粗准焦旋钮，使镜筒渐渐上升，直到视野内的物像清晰为止。此后改用细准焦旋钮，稍加调节焦距，使物像清晰。

3) 微调移动台或玻片移动器，找到欲观察的部分。要注意通常显微镜视野中的物像为倒像，移动玻片时应向相反方向移动。

5. 高倍倍观察。在低倍观察基础上，若想增加放大倍数，可进行高倍观察。方法为：

1) 将欲观察的部分，移至低倍镜视野正*，物像要清晰。

2) 旋转物镜转换器，使高倍物镜移到正确的位置上，随后稍微调节细准焦旋钮，即可使物像清晰。

3) 微调移动台或玻片移动器，定位欲仔细观察的部位。

注意：使用高倍物镜时，由于物镜与标本之间距离很近，因此不能动粗准焦旋钮，只能用细准焦旋钮。

6. 换片。观察完毕，如需换用另一玻片标片时，将物镜转回低倍，取出玻片，再换新片，稍加调焦，即可观察。不允许在高倍物镜下换片，以防损坏镜头。

显微镜使用注意事项

1. 显微镜是精密仪器，使用时必须按照操作规程，做到细心和耐心，切勿操之过急、动作过猛，以防操作失误而损坏构件 ^[2] 。

2. 不要用手触摸光学玻璃部分，同时防止剧烈碰撞而损坏构件。

3. 观察时一定要加盖玻片，不能让玻片上的水流到移动台上，更不能让酸、碱及其他化学药品接触显微镜，不能让显微镜在阳光下曝晒。

4. 使用细准焦旋钮时，如遇到不能继续向同一方向转动而到达极*，不能蛮拧，应向相反方向退转，并转动粗准焦旋钮，然后再用细准焦旋钮进行细调。

5. 目镜或物镜如有不洁时，要用专门的镜纸作直线方向揩拭，切勿用手指或手帕及棉布涂擦。目镜或物镜如沾有油污，可先用专门的镜纸沾少许二甲苯（或无水乙醇和Diethyl ether1∶1）擦拭干净，再用干净擦镜纸揩拭一遍。